[發明專利]經碘代乙酰基活化的瓊脂糖微球在提高多肽或蛋白類免疫原免疫原性中的應用

在審

• 申請號: 201910065007.4
• 申請日: 2019-01-23
• 公開（公告）號: CN109865137A
• 公開（公告）日: 2019-06-11
• 發明（設計）人: 方衛斌;張海靈
• 申請（專利權）人: 天德悅（北京）生物科技有限責任公司
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61P37/04
• 代理公司: 北京集智東方知識產權代理有限公司 11578
• 代理人: 陳亞斌;關兆輝

本發明涉及經碘代乙酰基活化的瓊脂糖微球的新用途，具體涉及經碘代乙酰基活化的瓊脂糖微球在提高多肽或蛋白類免疫原免疫原性中的應用。經碘代乙酰基活化的瓊脂糖微球上的碘代乙酰基可特異并高效的與多肽或蛋白類免疫原的巰基(?SH)發生不可逆的反應，生成共價結合的多肽?瓊脂糖樹脂復合物或蛋白?瓊脂糖樹脂復合物，該復合物具有較高的分子量，較大的異質性和難于降解性，可極大提高多肽或蛋白類免疫原的免疫原性。

技術領域

本發明涉及經碘代乙酰基活化的瓊脂糖微球的新用途，具體涉及經碘代乙酰基活化的瓊脂糖微球在提高多肽或蛋白類免疫原免疫原性中的應用。

背景技術

抗體(antibody)是機體在抗原物質刺激下，由B細胞分化成的漿細胞所產生的、可與相應抗原發生特異性結合反應的免疫球蛋白。用于制備抗體的免疫原可以是蛋白、多肽或核酸等，由于小分子蛋白或多肽抗原性較差，單一免疫很難產生良好的免疫反應，只有和適當的載體和佐劑結合才能達到理想的效果。載體可以提高抗原的免疫原性，增強動物機體的免疫反應；佐劑除了提高抗原的免疫原性外，還可以延長抗原的時效。

目前，較為常用的抗原載體有：蛋白類的牛血清白蛋白(BSA)、血藍蛋白(KLH)、卵清白蛋白(OVA)等；多肽類聚合物的多聚賴氨酸；大分子聚合物和某些顆粒，如聚乙烯吡咯烷酮、活性炭、羧甲基纖維素等。目的蛋白或多肽與活化的載體交聯后，得到免疫原。另一類較為常用的方法是，將目的蛋白或多肽與某種大分子量標簽蛋白進行融合表達。兩種方法的目的都是通過增加抗原的分子量來增強機體的免疫反應。

發明內容

本發明的目的在于提供經碘代乙酰基活化的瓊脂糖微球的新用途。

實際上本發明涉及經碘代乙酰基活化的瓊脂糖微球在提高多肽或蛋白類免疫原免疫原性中的應用。

還涉及經碘代乙酰基活化的瓊脂糖微球在提高多肽α-syn免疫原性中的應用。

還涉及經碘代乙酰基活化的瓊脂糖微球在提高多肽Olfr560免疫原性中的應用。

還涉及經碘代乙酰基活化的瓊脂糖微球在提高蛋白HSP90α免疫原性中的應用。

還涉及經碘代乙酰基活化的瓊脂糖微球在提高蛋白eNOS免疫原性中的應用。

本發明涉及的經碘代乙酰基活化的瓊脂糖微球上的碘代乙酰基可特異并高效的與多肽或蛋白類免疫原的巰基(-SH)發生不可逆的反應，生成共價結合的多肽-瓊脂糖微球復合物或蛋白-瓊脂糖微球復合物，該復合物具有較高的分子量，較大的異質性和難于降解性，可極大提高多肽或蛋白類免疫原的免疫原性。

另外，經碘代乙酰基活化的瓊脂糖微球與多肽或蛋白類免疫原的結合速度很快，與多肽類免疫原的結合，2小時內就可完成；與蛋白類免疫原的結合， 3.5小時內就可完成。而且，只需將多肽或蛋白類免疫原與經碘代乙酰基活化的瓊脂糖微球混合，靜止狀態下即可進行結合，省時省力；經碘代乙酰基活化的瓊脂糖微球還具有較高的結合力，減少了免疫原的液體體積；而且該活化的瓊脂糖微球與蛋白類免疫原的交聯條件寬泛，在pH7.2-9.0之間都可進行；反應液可為水溶液、有機溶劑或變性劑。

原核表達的異源蛋白，經常以包涵體形式存在，這時需要將包涵體用變性劑溶解后去免疫。而該活化的瓊脂糖微球與變性劑的兼容性，使得包涵體蛋白的交聯成為可能。

附圖說明

圖1為本發明實施例一以瓊脂糖微球為載體的Western Blot檢測結果條帶圖；

圖2為本發明實施例一以KLH為載體的Western Blot檢測結果條帶圖；

圖3為本發明實施例二以瓊脂糖微球為載體的Western Blot檢測結果條帶圖；

圖4為本發明實施例二以KLH為載體的Western Blot檢測結果條帶圖；