[發明專利]一種錦雞兒芽增殖與植株再生的方法及其培養基

有效

• 申請號: 201910064906.2
• 申請日: 2019-01-23
• 公開（公告）號: CN110024688B
• 公開（公告）日: 2022-04-12
• 發明（設計）人: 李花花;康紅梅
• 申請（專利權）人: 甘肅省科學院生物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 蘭州振華專利代理有限責任公司 62102
• 代理人: 張晉

本發明提供了一種錦雞兒芽增殖與植株再生的方法，通過材料準備、莖段腋芽誘導、芽繼代增殖、生根培養、植株移栽等步驟，建立了錦雞兒芽增殖與植株再生的方法，本方法為錦雞兒的組織培養提供了穩定高效的快繁體系，有效保證了錦雞兒組培體系的高生根率和存活率，為錦雞兒快繁體系的擴大發展和推廣種植提供了有力的技術保障。

發明領域

本發明涉及植物組織培養領域，具體為一種錦雞兒芽增殖與植株再生的方法及其培 養基。

背景技術

錦雞兒(Caragana sinica)又名金雀花、娘娘襪，是豆科錦雞兒屬灌木。主要分布于 我國山西、內蒙古、新疆、河北、河南、山東、陜西、甘肅、湖北、湖南、四川、吉林、遼 寧、黑龍江、江西等省、區。耐瘠薄,生于山坡,于石灰巖山地土層淺薄處也常見，常與雜 草及其他灌木混生。錦雞兒具有食用、飼養、綠肥、薪碳、蜜源等資源價值，其根或根皮可 入藥(中藥名：金雀根)，富含的二苯乙烯類化合物具有多種活性，可促進成骨細胞增殖， 具有預防骨質疏松的功效。錦雞兒植物是西部恢復生態的先鋒樹種，是防沙治沙發展畜牧業 的優選灌木植物，具有極高的生態價值、經濟價值和藥用價值。

錦雞兒種子采集困難，其繁殖一般采取扦插、分株、壓條等方法，繁殖系數低，時間周期長，生根困難，無法滿足市場和科研需求。組織培養能短時間內獲得大量苗木，且不受季節因素影響，可常年進行。目前，對于錦雞兒及其同屬植物組織培養方面的研究雖然已有一些，但缺少穩定高效的快繁體系，生根率及存活率較低。

發明內容

本發明的目的是提供一種克服現有技術不足，提出一種錦雞兒芽增殖與植株再生的 方法及其培養基。

本發明的目的一是提供一種錦雞兒芽增殖與植株再生的方法，具體包括如下步驟：

(1)材料準備：采取3～4年齡的錦雞兒半木質化枝條為外植體，剪去葉片后消毒，將消 毒后的外植體剪成1.0～1.5cm長單節莖段備用。

(2)莖段腋芽誘導：將步驟(1)獲得的莖段接種到芽誘導培養基中，置于透氣瓶 中培養，培養間溫度23-26℃，光照時間14h/d,光照強度約3000Lux，培養40d。芽誘導培 養基配方為：在MS培養基中加入6g.L^-1瓊脂和30g.L^-1蔗糖,添加15uM 6-芐氨基腺嘌呤 (6-BA)和1uM萘乙酸(NAA)，pH值調整為5.8～6.0。

(3)芽繼代增殖：將步驟(2)中誘導出的新生幼芽剪成0.5～1cm長的單節莖段， 接種到繼代增殖培養基中，置于透氣瓶中培養，培養間溫度23-26℃，光照時間14h/d,光照 強度約3000Lux，培養30d。芽繼代增殖培養基配方為：在MS培養基中加入6g.L^-1瓊脂 和30g.L^-1蔗糖，添加5uM 6-BA、0.1uM NAA和2uM GA₃，pH值調整為5.8～6.0。

(4)生根培養：切取步驟(3)獲得的3cm以上的健壯芽至MS培養基中，30d后接 種到生根培養基中，置于透氣瓶中培養，培養條件為0.15％CO₂，培養溫度20-25℃，光照 時間14h/d，光照強度3300Lux，RH 90％，培養30d。生根培養基配方為：在1/2MS中添 加6g.L^-1瓊脂和10g.L^-1的蔗糖，pH值調整為5.8～6.0。

(5)將步驟(4)得到的生根的植株移栽到混合基質中，即珍珠巖：蛭石：腐質土 ＝1：1：3。

作為優選，所述錦雞兒半木質化枝條為4-5月的新生枝條。

本發明的目的二是提供一套錦雞兒芽增殖與植株再生的培養基，具體包括以下內容： (1)芽誘導培養基配方：在MS培養基中加入6g.L^-1瓊脂和30g.L^-1蔗糖,添加15uM 6- BA和1uM NAA。