[發(fā)明專利]一種尿液中膽酸類成分的檢測(cè)方法及通過(guò)尿液分析蒙醫(yī)體質(zhì)的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910063100.1
• 申請(qǐng)日: 2019-01-23
• 公開（公告）號(hào): CN109856304A
• 公開（公告）日: 2019-06-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 包曉華;包黎明;春香;王麗娟
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 內(nèi)蒙古民族大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/88
• 分類號(hào): G01N30/88;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/54
• 代理公司: 西安中科匯知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 61254
• 代理人: 劉玲玲

1.尿液中膽酸類成分的檢測(cè)方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)將凍存尿樣常溫解凍離心10-20min，分別取兩組尿液上清液2-4mL加入至HLB固相萃取柱中，標(biāo)記為萃取柱A和萃取柱B；

(2)將萃取柱A和萃取柱B以超純水依次洗脫，棄去超純水洗脫液；

(3)將萃取柱A和萃取柱B再用甲醇依次洗脫，收集甲醇洗脫液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上回收甲醇；

(4)采用超高效液相檢測(cè)方法和電噴霧正離子模式檢測(cè)方法對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的尿液中膽酸類成分的檢測(cè)方法，其特征在于，所述的超高效液相檢測(cè)方法的條件包括柱溫、流動(dòng)相、梯度洗脫和流速。

3.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)中所述的尿液中膽酸類成分的檢測(cè)方法，其特征在于，所述的超高效液相柱溫為30-50℃，優(yōu)選地40℃。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)中所述的尿液中膽酸類成分的檢測(cè)方法，其特征在于，所述的超高效液相的流動(dòng)相A：0.05-0.2％甲酸，優(yōu)選地0.1％；流動(dòng)相B為乙腈。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)中所述的尿液中膽酸類成分的檢測(cè)方法，其特征在于，所述的超高效液相梯度洗脫條件：0～3min，10％～80％流動(dòng)相B；3～6min，80％～98％流動(dòng)相B；6～8min，98％流動(dòng)相B；8～10min，98％～10％流動(dòng)相B；10～12min，10％流動(dòng)相B。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)中所述的尿液中膽酸類成分的檢測(cè)方法，其特征在于，所述的超高效液相的流速：0.3-0.6mL/min，優(yōu)選地0.4mL/min。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的尿液中膽酸類成分的檢測(cè)方法，其特征在于，所述的電噴霧正離子模式檢測(cè)的質(zhì)量掃描范圍m/z 100～1100；脫溶劑氣流量為400L/h；脫溶劑氣溫度為400℃；毛細(xì)管電壓為3.5kV；碎裂電壓為50V；錐孔電壓為40V和內(nèi)標(biāo)物。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的尿液中膽酸類成分的檢測(cè)方法，其特征在于，所述的內(nèi)標(biāo)物為亮氨酸腦啡肽。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)中所述的尿液中膽酸類成分的檢測(cè)方法，其特征在于，所述的膽酸類成分包括7-磺酸膽堿和3-氧代-4,6-二氫膽酸。

10.一種通過(guò)尿液中膽酸類成分來(lái)判斷蒙醫(yī)希拉體質(zhì)的方法，其特征在于，尿液中檢測(cè)到7-磺酸膽堿含量為24.57-31.87ng/mL和3-氧代-4,6-二氫膽酸含量為44.98-55.48ng/mL為希拉體質(zhì)。