[發明專利]一種間充質干細胞保存液、其制備方法及其應用

在審

• 申請號: 201910062149.5
• 申請日: 2019-01-22
• 公開（公告）號: CN109568344A
• 公開（公告）日: 2019-04-05
• 發明（設計）人: 周海濤
• 申請（專利權）人: 藥鼎（北京）國際細胞醫學技術有限公司
• 主分類號: A61K35/28
• 分類號: A61K35/28;A61K9/08;A61P7/06;A61P37/02;A61P29/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 嚴誠

本發明實施例提供了一種間充質干細胞保存液、其制備方法及其應用，該間充質干細胞保存液包括有勃脈力A電解質注射液、胰島素、雌激素、孕激素以及亞硒酸鈉、肝素鈣和人血白蛋白。由上述組分組成的保存液能夠支持干細胞尤其是臍帶間充質干細胞的生命狀態，避免細胞活性快速下降甚至死亡，具有能夠長時間保存干細胞的優點。

技術領域

本發明涉及干細胞制劑保存液技術領域，具體而言，涉及一種間充質干細胞保存液、其制備方法及其應用。

背景技術

間充質干細胞(mesenchymal stem cells，MSC)是中胚層來源的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的多能干細胞。事實上，MSC廣泛存在于全身多種組織中，幾乎來源于機體所有的組織器官，如骨髓、骨膜、脂肪組織、牙髓、滑膜、臍帶、胎盤、羊水及胎兒組織等。

不同來源的間充質干細胞具有相似的形態，表達相同的表面標記，具有相似的生物學特性方面，如可在體外培養擴增，并能在特定條件下分化為包括神經細胞、成骨細胞、軟骨細胞、肌肉細胞、脂肪細胞在內的多組織系統的細胞。MSC除了具有多向組織細胞分化能力之外，還在造血、免疫炎癥反應、血管新生等人體重要功能中起重要調節作用。

臍帶間充質干細胞(UC-MSC)是指存在于新生兒臍帶組織中的一種多功能干細胞。臍帶間充質是一類低免疫原性細胞，且具有很強的免疫調節功能。臍帶間充質干細胞擁有MSC的全部特性，并且含量豐富，易于分離培養。

與其他來源的MSC相比，UC-MSC更原始，是介于胚胎干細胞和成體干細胞之間的干細胞，其增殖和分化能力比胚胎干細胞低，但明顯高于成體干細胞。

臍帶間充質干細胞具有多分化潛能，在特定的誘導條件下，UC-MSC不僅能分化為骨、軟骨、脂肪、肌腱等中胚層細胞，而且能夠向內胚層組織細胞(如心肌細胞、肝細胞)和外胚層組織細胞(如神經細胞)分化。UC-MSC不具致瘤性，能在不同的誘導條件及合適的體內生長微環境中，安全地定向分化為不同的組織細胞系，具有修復各種組織和器官的能力。

臨床常用0.9％氯化鈉注射液、5％葡萄糖注射液、1％人血白蛋白溶液與5％人血白蛋白溶液、復方電解質注射液作為臍帶間充質干細胞的制劑保存液，但這些保存液在6h后，細胞活性已非常低，會引起治療效果的嚴重下降。

發明內容

本發明的第一目的在于提供一種間充質干細胞保存液，其能夠支持干細胞尤其是臍帶間充質干細胞的生命狀態，避免細胞活性快速下降甚至死亡，具有能夠長時間保存干細胞的優點。

本發明的第二目的在于提供一種臍帶間充質干細胞的保存方法，采用該保存方法能夠長時間地維持干細胞，尤其是臍帶間充質干細胞的活性。

本發明的第三目的在于提供一種間充質干細胞保存液的制備方法，該制備方法能夠制備出具有長時間保存干細胞的保存液。

本發明的第四目的在于提供一種用于制備臍帶間充質干細胞的試劑盒。

本發明的第五目的在于提供一種臍帶間充質干細胞注射液。

本發明是這樣實現的：

一種間充質干細胞保存液，其包括有勃脈力A電解質注射液、胰島素、雌激素、孕激素、亞硒酸鈉、肝素鈣以及人血白蛋白。該保存液具有能夠長時間維持干細胞生命狀態的優點，能夠避免由于缺氧、饑餓等原因引起的細胞損傷甚至細胞死亡。肝素鈣可以有效降低細胞的聚集，減緩制劑后細胞結團過程。人血白蛋白能為細胞提供必需的營養組分，維持細胞的生理狀態。

具體地，在該間充質干細胞保存液中，胰島素的終濃度為0.1μg/L、0.15μg/L、0.2μg/L、0.25μg/L或0.3μg/L，在一些實施例中，胰島素的終濃度可以在0.1～0.3μg/L的范圍內選擇；