[發明專利]依諾肝素鈉中殘留銨的檢測方法

有效

• 申請號: 201910060320.9
• 申請日: 2019-01-22
• 公開（公告）號: CN111458418B
• 公開（公告）日: 2022-07-19
• 發明（設計）人: 李鐵健;楊欣茹
• 申請（專利權）人: 魯南制藥集團股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于醫藥技術領域，具體提供了一種依諾肝素鈉中殘留銨的檢測方法。以離子色譜法分析檢測依諾肝素鈉中的殘留銨，采用高效陽離子交換柱分離，以陽離子自動再生抑制器或適宜的化學抑制器的電導檢測器檢測，以甲磺酸溶液為流動相，外標法定量檢測依諾肝素鈉中的殘留銨。本發明的檢測方法，能夠快速有效檢測依諾肝素鈉中的殘留銨的含量，線性關系良好，精密度高，準確度良好，重復性和耐用性好，整個操作非常簡單，填補了測定依諾肝素鈉中殘留銨含量的空白。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，具體涉及一種依諾肝素鈉中殘留銨的檢測方法。

背景技術

依諾肝素鈉是由來源于豬腸黏膜的肝素鈉經成鹽，酯化后得到的肝素-苯索氯銨鹽的芐基酯衍生物在堿性條件下發生beta-消除反應裂解生成的低分子量肝素鈉，其主要特征為糖鏈的非還原末端具有4-烯醇吡喃糖酸，在糖鏈的還原末端含有15～20％的1,6-酐環狀結構。平均分子量為3800～5000，小于2000含量為12.0～20.0％，2000～8000含量為68.0～82.0％。抗FХa活性為90～125IU/mg，抗FⅡa活性為20～35IU/mg，抗FХa/抗FⅡa為3.3～5.3。硫酸根與羧基比不小于1.8。依諾肝素鈉結構式如下所示。

依諾肝素鈉

對依諾肝素鈉的化學結構進行分析，依諾肝素鈉主要的降解反應為糖苷鍵斷裂、硫酸基脫落等，依諾肝素鈉的這些降解反應可能產生殘留的銨根離子、硫酸根離子等，因此需要對產品中的殘留銨離子和硫酸根離子進行檢測。目前硫酸根離子已有標準且多篇文獻已經報道，但是依諾肝素鈉中殘留銨的檢測方法卻鮮有報道。因此很有必要提供一種依諾肝素鈉中殘留銨的檢測方法。

發明內容

依諾肝素鈉中鈉離子含量較高，銨根離子含量較低，檢測依諾肝素鈉中的殘留銨時很容易受到鈉離子的干擾，鈉離子峰如有拖尾等現象，直接導致銨根離子檢測不出。現有技術中銨根離子的檢測方法分離度1.5遠遠不夠，不能解決高濃度的鈉離子對銨根離子的干擾問題，本發明的目的在于克服依諾肝素鈉中殘留銨檢測時高濃度的鈉離子的干擾，提供一種依諾肝素鈉中殘留銨的檢測方法。

本發明的技術方案如下：

一種離子色譜法分析檢測依諾肝素鈉中殘留銨的方法，采用高效陽離子交換柱分離，以陽離子自動再生抑制器或適宜的化學抑制器的電導檢測器檢測，以甲磺酸溶液為流動相，外標法定量檢測依諾肝素鈉中的殘留銨。

本發明檢測殘留銨的方法，是采用離子色譜系統檢測待測樣品；其中色譜柱為CS17陽離子交換柱或性能相當的CS12、CS16陽離子交換柱，流動相為甲磺酸溶液，流速為0.8～1.2mL/min，以陽離子自動再生抑制器檢測。

優選地，所述色譜柱規格為4mm×250mm。

更加優選地，所述色譜柱還包括保護柱，例如陽離子交換柱CS17分析柱(4mm×250mm)和CG17保護柱(4mm×50mm)。

優選地，所述方法中，待測樣品的進樣體積為10～25μL。

優選地，所述方法中，流動相流速為1.0mL/min。

優選地，所述方法是采用甲磺酸溶液進行梯度洗脫；0～40min，甲磺酸溶液濃度為5～60mmol/L。

優選地，所述方法中梯度洗脫表為：

更加優選地，所述方法中梯度洗脫表為：

在一個優選的試驗方案中，該檢測方法包括如下步驟：

(1)對照品溶液配制