[發(fā)明專利]一株貝萊斯芽孢桿菌及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910060215.5
• 申請日: 2019-01-22
• 公開（公告）號: CN109652336A
• 公開（公告）日: 2019-04-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 譚壽湖;張琦敏;梁春吉
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西金穗生態(tài)科技股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;A01P21/00;C05F11/08;C12R1/07
• 代理公司: 北京遠(yuǎn)大卓悅知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11369
• 代理人: 靳浩

1.一種貝萊斯芽孢桿菌，其特征在于，所述貝萊斯芽孢桿菌于2018年12月4日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏名稱CK3-15，保藏號CGMCC No.16867。

2.如權(quán)利要求1所述的貝萊斯芽孢桿菌，其特征在于，所述貝萊斯芽孢桿菌用于防控香蕉枯萎病。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的貝萊斯芽孢桿菌，其特征在于，所述貝萊斯芽孢桿菌用于制備微生物肥料。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的貝萊斯芽孢桿菌，其特征在于，所述貝萊斯芽孢桿菌用于促進(jìn)作物生長。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的貝萊斯芽孢桿菌，其特征在于，所述貝萊斯芽孢桿菌用于與枯草芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌或甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌復(fù)合制備微生物肥料。

6.一種應(yīng)用權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的貝萊斯芽孢桿菌制備微生物肥料的方法，所述微生物肥料包括液體微生物菌劑、粉劑微生物菌劑、顆粒微生物菌劑和生物有機(jī)肥，其特征在于，包括以下步驟：

1)菌種活化：將所述貝萊斯芽孢桿菌在NA培養(yǎng)基試管斜面上劃線，33-36℃培養(yǎng)22-25小時(shí)，獲得活化菌；

2)一級種子培養(yǎng)：用接種環(huán)刮取步驟1)試管斜面上的活化菌，接種于NB液體培養(yǎng)基中，33-36℃，180-200rmp，搖瓶培養(yǎng)18-20小時(shí)，獲得一級種子液；

3)二級種子液制備：將所述一級種子液按體積比為1-10％的比例接種到NB培養(yǎng)基中，33-36℃培養(yǎng)18-20小時(shí)，全程通氣攪拌培養(yǎng)，在0-8小時(shí)通氣量為6-8m³/h，攪拌轉(zhuǎn)速100-120rpm，在8-18小時(shí)通氣量為10-12m³/h，攪拌轉(zhuǎn)速150-160rpm；

4)三級發(fā)酵培養(yǎng)：將所述二級種子液以體積比為1-10％的接種量轉(zhuǎn)入到發(fā)酵培養(yǎng)基中，全程通氣攪拌培養(yǎng)，在0-8小時(shí)通氣量為100-120m³/h，攪拌轉(zhuǎn)速100-120rpm，在8-18小時(shí)通氣量為140-150m³/h，攪拌轉(zhuǎn)速150-160rpm，35-37℃培養(yǎng)30-48小時(shí)，發(fā)酵結(jié)束，獲得高密度發(fā)酵菌液；

5)液體微生物菌劑的制備：往所述高密度菌液中添加糖蜜濃縮液或糖蜜干粉，邊加邊攪拌混勻，所述糖蜜濃縮液或糖蜜干粉添加量為高密度發(fā)酵菌液的6-50％之間，密封常溫貯藏，獲得所述液體微生物菌劑；

6)粉劑微生物菌劑的制備：往所述液體微生物菌劑中添加β環(huán)糊精，經(jīng)噴霧干燥，獲得所述粉劑微生物菌劑；

7)顆粒微生物菌劑的制備：將液體微生物菌劑或粉劑微生物菌劑與有機(jī)載體混合均勻，經(jīng)造粒，獲得所述顆粒微生物菌劑；

8)生物有機(jī)肥的制備：往發(fā)酵腐熟的有機(jī)肥中添加所述液體微生物菌劑或粉劑微生物菌劑，經(jīng)過混合均勻后粉碎篩分打包，獲得所述生物有機(jī)肥。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的貝萊斯芽孢桿菌制備微生物肥料的方法，其特征在于，所述NA培養(yǎng)基包括以下原料和組分：牛肉浸膏5-7重量份，蛋白胨10-15重量份，氯化鈉5-7重量份，瓊脂18-20重量份和水1000重量份，pH為7.0；

所述NB液體培養(yǎng)基包括以下原料和組分：牛肉浸膏5-7重量份，蛋白胨10-12重量份，氯化鈉5-8重量份和水1000重量份，pH為6.0；

所述發(fā)酵培養(yǎng)基包括以下原料和組分：糖蜜干粉1-8重量份，玉米粉0.02-0.12重量份，硫酸鎂0.02-0.10重量份，葡萄糖0.01-0.08重量份和酵母浸膏0.02-0.12重量份，余量為水，pH為6.0-8.0。

8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的貝萊斯芽孢桿菌制備微生物肥料的方法，其特征在于，步驟5)中，往高密度發(fā)酵菌液中添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3-5％的硅藻土，混合均勻后再添加糖蜜濃縮液或糖蜜干粉。