[發明專利]實時監測單個微孢子蟲孢子發芽動態和過程的方法在審
| 申請號： | 201910059612.0 | 申請日： | 2019-01-22 |
| 公開（公告）號： | CN110452953A | 公開（公告）日： | 2019-11-15 |
| 發明（設計）人： | 王桂文;張宇;苗振檳;張鵬飛;黃旭華;王曉春 | 申請（專利權）人： | 王桂文;廣西科學院 |
| 主分類號： | C12Q1/02 | 分類號： | C12Q1/02;G01N21/65 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 530007廣西壯族*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 微孢子蟲孢子 發芽 實時監測 發芽過程 孢子 獲知 實時動態分析 研究微生物 單個孢子 光學成像 光學手段 拉曼光譜 生理機制 直觀監測 異質性 染色 驗證 分析 | ||
【權利要求書】：
1.一種實時監測單個微孢子蟲孢子發芽動態和過程的方法，其特征在于，
包括以下步驟：
（1）步驟一：采用倒置顯微鏡成像，附加相差附件；
（2）步驟二：采用高分子材料將大量單個孢子固定；
（3）步驟三：人工方法刺激孢子發芽并實時監測單個微孢子蟲孢子發芽動態和過程。
2.根據權利要求1所述實時監測單個微孢子蟲孢子發芽動態和過程的方法，其特征在于，
顯微鏡錨定高速相機。
3.根據權利要求所述實時監測單個微孢子蟲孢子發芽動態和過程的方法，其特征在于，
孢子人工發芽過程被高速相機實時記錄，記錄速度為每秒5~30幀。
4.根據權利要求3所述實時監測單個微孢子蟲孢子發芽動態和過程的方法，其特征在于，
發芽過程記錄的大量單個孢子亮度變化，通過Matlab自編程序讀取灰度值，并繪制亮度-時間曲線。
5.根據權利要求4所述實時監測單個微孢子蟲孢子發芽動態和過程的方法，其特征在于，
發芽過程孢子亮度變化動態經過單細胞拉曼光譜實時監測驗證。
6.根據權利要求5所述實時監測單個微孢子蟲孢子發芽動態和過程的方法，其特征在于，
通過780 nm激光俘獲單個微孢子蟲孢子，俘獲的孢子的拉曼信號由同一束激光激發；
采集俘獲孢子的發芽過程的拉曼光譜，建立單個孢子發芽過程特征峰強度（孢內物質含量）-時間曲線；
建立發芽過程孢子亮度變化動態與拉曼特征峰強度（孢內物質含量）的對應關系。
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