[發明專利]一種高通量自動化磁珠純化儀及其工作方法在審
| 申請號: | 201910058812.4 | 申請日: | 2019-01-22 |
| 公開(公告)號: | CN109679832A | 公開(公告)日: | 2019-04-26 |
| 發明(設計)人: | 周鴻坡 | 申請(專利權)人: | 周鴻坡 |
| 主分類號: | C12M1/12 | 分類號: | C12M1/12;C12M1/00;C12N15/10 |
| 代理公司: | 西安通大專利代理有限責任公司 61200 | 代理人: | 徐文權 |
| 地址: | 51800*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 電磁鐵 磁珠純化 高通量 磁珠 吸頭 自動化 時序電源 洗滌管 正壓泵 漂洗 吸附 通電 預設時間段 風險降低 交叉污染 通電狀態 出氣 洗滌瓶 磁鐵 便攜 廢液 壓出 洗滌 出口 | ||
本發明公開了一種高通量自動化磁珠純化儀,時序電源分別與正壓泵、第一電磁鐵和第二電磁鐵相連控制其工作狀態;當吸附磁珠時,時序電源控制第一電磁鐵或第二電磁鐵處于通電狀態,吸附處于洗滌管內的磁珠;當漂洗磁珠時,正壓泵的出氣進入洗滌瓶,將其內的洗滌液壓入吸頭內,經吸頭落入洗滌管內,第一電磁鐵和第二電磁鐵中未通電的磁鐵通電預設時間段,漂洗磁珠,產生的廢液經吸頭出口壓出。本發明還公開了該高通量自動化磁珠純化儀的工作方法。該高通量自動化磁珠純化儀體積小巧便攜,造價便宜,使用方便;一個樣品的純化需一個吸頭,不需要轉移樣品,樣品損耗小并且交叉污染的風險降低。
技術領域
本發明屬于DNA提純技術領域,尤其是一種高通量自動化磁珠純化儀及其工作方法。
背景技術
在分子生物學實驗室里,DNA基于磁珠純化的方法有很多,例如從以DNA為底物的反應產物中去除雜質蛋白,雜質鹽離子等以獲得純凈的DNA用于下游實驗等。利用磁珠來提純DNA是一個重復性比較強但是又耗費人工的一個工作,整個純化步驟如下:磁珠和待純化產物混合室溫孵育8分鐘,這一步驟是讓磁珠捕捉到DNA;然后將溶液處在一個磁場中,將磁珠聚集在一起;去除掉其余的溶液;加入濃度為80%的乙醇清洗磁珠,重復洗滌1次使殘留的溶液洗干凈;然后室溫靜置5分鐘使殘留的酒精揮發,加入一定體積的DNA回溶緩沖液,將磁珠混勻,DNA脫離磁珠進入緩沖液中,此時再次將溶液處于磁場中,收集溶液即得到純化好的DNA溶液,可以用于下游實驗。現有大多數實驗室在磁珠純化這一步是通過人工純化的,缺點就是會有人為的影響因素造成純化步驟不穩定;并且這種操作步驟重復性的實驗浪費人力。
目前已有的儀器例如kingfisher自動純化儀體積較大,儀器比較昂貴,不是所有實驗室都能夠用的起;它需要比較多的耗材才能進行,而且耗材還不是特別通用的;它是利用磁棒吸附磁珠然后一起依次轉移進入后續的溶液中,轉移過程具有交叉污染的風險,同時也會有一定的DNA損耗;而且使用不靈活,大多只適用于96孔板或24孔板,在只有幾個待純化樣本的情況下,使用該儀器用很大的空置率。
發明內容
本發明的目的在于克服上述現有技術的缺點,提供一種高通量自動化磁珠純化儀及其工作方法。
為達到上述目的,本發明采用以下技術方案予以實現:
一種高通量自動化磁珠純化儀,,包括若干吸頭、若干洗滌管、時序電源、第一電磁鐵和第二電磁鐵,洗滌管數量等于吸頭數量;
吸頭位于洗滌管內,兩者兩邊分別設有第一電磁鐵和第二電磁鐵,洗滌管內裝有吸附有DNA的磁珠,第一電磁鐵和第二電磁鐵由時序電源控制;
當吸附磁珠時,時序電源控制第一電磁鐵或第二電磁鐵處于通電狀態,吸附處于洗滌管內的磁珠;
當漂洗磁珠時,洗滌液經吸頭入口進入吸頭,經吸頭下端出口落入洗滌管內,將第一電磁鐵和第二電磁鐵中通電的磁鐵斷電且未通電的磁鐵通電,漂洗磁珠,產生的廢液經吸頭上端出口排出。
進一步的,還包括正壓泵和洗滌瓶;
正壓泵出氣口與洗滌瓶入口相連,洗滌瓶內裝有洗滌液,洗滌瓶出口與吸頭入口相連通,正壓泵由時序電源控制;
當時序電源啟動正壓泵時,正壓泵將空氣排入洗滌瓶內,將洗滌液經洗滌瓶出口壓入吸頭內。
進一步的,還包括廢液瓶和負壓泵;
吸頭上端出口與廢液瓶入口相連通,廢液瓶出口與負壓泵進氣口相連通,負壓泵由時序電源控制;
當時序電源啟動負壓泵時,負壓泵抽取廢液瓶內的空氣,進而在吸頭與廢液瓶之間的管道產生負壓,將吸頭內的液體吸入吸頭內。
進一步的,負壓泵出口設有第三過濾器。
進一步的,正壓泵的進氣口處設有第一過濾器,洗滌瓶入口處設有第二過濾器,廢液瓶出口處設有第四過濾器。
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