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[發明專利]一種液質聯用測定血漿中頭孢羥氨芐濃度的方法在審

專利信息
申請號: 201910039868.5 申請日: 2019-01-16
公開(公告)號: CN109682913A 公開(公告)日: 2019-04-26
發明(設計)人: 黃靖智 申請(專利權)人: 徐州立興佳正醫藥科技有限公司
主分類號: G01N30/88 分類號: G01N30/88;G01N30/34
代理公司: 徐州市淮海專利事務所 32205 代理人: 李妮
地址: 221000 江蘇省徐州市泉*** 國省代碼: 江蘇;32
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 頭孢羥氨芐 血漿 聯用 種液 預處理 混合有機溶劑 血藥濃度測定 液質聯用系統 色譜柱分離 質譜檢測器 待測樣品 曲線線性 血漿標準 靈敏度 萃取 羥氨 檢測
【說明書】:

發明公開了一種液質聯用測定血漿中頭孢羥氨芐濃度的方法,采用液質聯用系統測定,先取待測樣品,加入一定量的混合有機溶劑進行萃取兩次,預處理后,經色譜柱分離,用質譜檢測器檢測。本發明方法快速、準確、靈敏度高、操作簡便,為頭孢羥氨芐的血藥濃度測定提供依據;本方法的血漿標準曲線線性范圍為0.1~60ug/mL,批內和批間精密度RSD均小于±15%,適合于測定血漿中頭孢羥氨芐的濃度。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域,具體涉及一種藥物的測定方法,特別涉及一種液質聯用測定血漿中頭孢羥氨芐濃度的方法。

背景技術

頭孢羥氨芐(Cefadroxil,CFD),化學名稱為:(6R,7R)-3-甲基-7-[(R)-2-氨基-2-(4-羥基苯基)乙酰氨基]-8-氧-5-硫雜-1-雙環[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸一水合物,分子式:C16H17N3O5S·H2O,分子量為:381.41,結構式為:

頭孢羥氨芐是一種殺菌的頭孢菌素類廣譜抗生素,美國勃列斯多-邁耶公司第一代半合成的頭孢菌素類藥物,對革蘭氏陽性和革蘭氏陰性細菌的感染有效。口服頭孢羥氨芐制劑可用于治療輕度至中度易受感染,如因細菌化膿性鏈球菌引起的咽喉炎或鏈球菌扁桃體炎、尿路感染、生殖道感染和皮膚感染,其具有良好的水溶性和一定的脂溶性,口服吸收良好,而且不受胃內食物影響,在腸胃道吸收和尿中消除都比較慢,在感染病灶有較強的分布能力及抗菌作用。因此,頭孢羥氨芐制劑的藥用經濟性高,具有廣闊的市場前景。

目前,尚未關于頭孢羥氨芐測定方法的文獻報道。

發明內容

本發明的目的在于提供一種液質聯用測定血漿中頭孢羥氨芐濃度的方法,該方法可提高檢測的速度、精度和靈敏度。

為實現上述目的,一種液質聯用測定血漿中頭孢羥氨芐濃度的方法,血漿樣品經預處理后經高效液相色譜-串聯質譜檢測其濃度,具體方法包括以下步驟:

(1)血漿樣品預處理:

以K2EDTA為抗凝劑,以頭孢羥氨芐-d4為內標;于96深孔板中精密加入100uL的血漿樣品,加入5uL的體積分數為50%的甲醇水溶液,混勻后加入5uL的0.02ug/uL的內標頭孢羥氨芐-d4溶液,混勻后加入500uL乙腈于96深孔板中,渦旋混合1min,于6℃以3000rpm離心10min,取上層清液50uL至裝有1000uL混合有機溶劑的96深孔板中,混合有機溶劑為甲醇:水:甲酸按照體積比85:15:0.1混合得到的混合物,渦旋混勻,于6℃以3000rpm離心5min后作為測試樣品待檢測;以上過程中除了渦旋和離心,其他過程均需于冰浴條件下操作;

(2)試樣測定:

取10uL測試樣品注入高效液相色譜-串聯質譜儀中,檢測樣品中頭孢羥氨芐和內標頭孢羥氨芐-d4的色譜峰,并據此計算所述血漿樣品中的頭孢羥氨芐濃度;

(3)液相色譜條件:

色譜柱:RestekAllure PFPP,5um,柱規格為50×2.1mm;色譜柱溫:40℃;流動相A:水/甲酸的體積百分比為100/0.1;流動相B:甲醇/甲酸的體積百分比為100/0.1;洗液:乙腈/水的體積百分比為50/50;自動進樣器溫度為6℃;梯度洗脫,流速為0.4mL/min,進樣量為10uL,分析時間3.5min;

(4)質譜條件:

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