[發(fā)明專利]檢測氯丙那林的酶聯(lián)免疫試劑盒及其應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910037682.6 | 申請日: | 2019-01-16 |
| 公開(公告)號: | CN109813922B | 公開(公告)日: | 2023-01-20 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 萬宇平;馮才偉;王兆芹;朱亮亮;崔海峰;賈芳芳;魏力杰;叢倩千;曹東山;趙正苗 | 申請(專利權(quán))人: | 北京勤邦生物技術(shù)有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/94 | 分類號: | G01N33/94 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 102206 北京市昌平*** | 國省代碼: | 北京;11 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 檢測 免疫 試劑盒 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種檢測氯丙那林的酶聯(lián)免疫試劑盒,其特征在于包括:包被有包被原的酶標(biāo)板、氯丙那林標(biāo)準(zhǔn)品溶液、氯丙那林抗體、酶標(biāo)二抗、底物顯色液、終止液、洗滌液、復(fù)溶液,所述包被原為氯丙那林偶聯(lián)抗原,所述酶標(biāo)二抗為酶標(biāo)記的氯丙那林抗抗體,所述氯丙那林抗體是以氯丙那林偶聯(lián)抗原作為免疫原免疫動物得到的,所述氯丙那林偶聯(lián)抗原是由氯丙那林半抗原與載體蛋白偶聯(lián)得到,所述氯丙那林半抗原的制備方法如下:
取3-(2-氯苯基)環(huán)氧乙烷-2羧酸1.0g,加甲醇50ml溶解,加異丙胺0.31g,攪拌10min,充分混勻,滴加冰乙酸0.2ml,65℃加熱,攪拌反應(yīng)24h;停止反應(yīng),旋蒸,除去甲醇,加水30ml,乙酸乙酯50ml×3萃取三次,合并有機相,無水硫酸鈉干燥,上硅膠柱,二氯甲烷與甲醇的體積比為10:1,洗脫分離,得到羧基氯丙那林1.2g,收率93%,即為半抗原產(chǎn)物;
所述氯丙那林半抗原的分子結(jié)構(gòu)式為:
。
2.如權(quán)利要求1所述的試劑盒,所述氯丙那林抗體為氯丙那林單克隆抗體或氯丙那林多克隆抗體。
3.如權(quán)利要求1所述的試劑盒,其特征在于所述免疫原的制備方法如下:
取羧基氯丙那林半抗原16mg,加DMF 1ml溶解,加N-琥珀酰亞胺8.5mg,加環(huán)己基碳二亞胺18mg,室溫反應(yīng)3h,有少量渾濁,過濾除去沉淀,得到半抗原活化液A液;取白喉毒素10mg,加0.02M PB 2ml緩沖液溶解,得到B液,將A液滴加到B液中,4℃反應(yīng)12h,0.02M PB緩沖液透析純化3天,每天換液3次,得到免疫原。
4.一種檢測樣品中氯丙那林含量的方法,包括步驟:
(1)樣品前處理;
(2)用權(quán)利要求1~3任一項所述的試劑盒進行檢測;
(3)分析檢測結(jié)果。
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