[發(fā)明專利]一種乳酸菌的有氧高密度培養(yǎng)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910024620.1
• 申請日: 2019-01-10
• 公開（公告）號: CN109536422B
• 公開（公告）日: 2022-02-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 蒙健宗;潘勤春;葉柳健;韓佳臨;馮旄;甘敏鑫;周禮芹
• 申請（專利權(quán)）人: 廣西大學(xué);南寧新科健生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/25;C12R1/23;C12R1/245;C12R1/01;C12R1/225
• 代理公司: 北京天奇智新知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11340
• 代理人: 牙斐穎

1.一種乳酸菌的有氧高密度培養(yǎng)方法，其特征在于，將乳酸菌接種到含有氧抑制劑的培養(yǎng)基中，在通入空氣的條件下進行分批發(fā)酵培養(yǎng)或分批補料發(fā)酵培養(yǎng)；在培養(yǎng)基成分中添加的氧抑制劑的組成如下：培養(yǎng)基體積0.1%-1.0%的牛肝細胞提取物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種乳酸菌的有氧高密度培養(yǎng)方法，其特征在于，所述乳酸菌為兼性厭氧乳酸菌，具體為植物乳桿菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、糞腸球菌、屎腸球菌、乳酸腸球菌、德式乳桿菌乳酸亞種、鼠李糖乳桿菌、乳酸片球菌、戊糖片球菌、戊糖乳桿菌、羅伊氏乳桿菌、纖維二糖乳桿菌、發(fā)酵乳桿菌、德氏乳桿菌保加利亞亞種、產(chǎn)丙酸丙酸桿菌、布氏乳桿菌、副干酪乳桿菌中的一種或多種。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種乳酸菌的有氧高密度培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的乳酸菌在發(fā)酵培養(yǎng)中通入空氣的量為0.1 vvm-2.0 vvm。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種乳酸菌的有氧高密度培養(yǎng)方法，其特征在于，所述的牛肝細胞提取物的制備方法為：新鮮牛肝切碎，加入預(yù)冷到2-5℃的2-3倍體積的pH7.0磷酸緩沖液，用組織勻漿機攪碎為勻漿，室溫靜置4-5小時，離心，收集上清液；沉淀物再用預(yù)冷到2-5℃的2-3倍體積的pH7.0磷酸緩沖液重復(fù)提取一次，合并兩次提取液，用截留分子量為10KD的超濾膜濃縮8-10倍，將濃縮液過濾除菌，即為牛肝細胞提取物。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種乳酸菌的有氧高密度培養(yǎng)方法，其特征在于，所述分批發(fā)酵培養(yǎng)是將乳酸菌接種到培養(yǎng)基后，用無菌操作方法加入氧抑制劑，發(fā)酵過程通入空氣，并保持37℃，攪拌100 r/m，發(fā)酵至pH下降至6.8后，自動流加體積分?jǐn)?shù)10%的氨水調(diào)節(jié)pH=6.8±0.2。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種乳酸菌的有氧高密度培養(yǎng)方法，其特征在于，所述分批補料發(fā)酵培養(yǎng)是將乳酸菌接種到培養(yǎng)基后，用無菌操作方法加入氧抑制劑，發(fā)酵過程通入空氣，并保持37℃，攪拌100 r/m，發(fā)酵至pH下降至6.8后，自動流加體積分?jǐn)?shù)10%的氨水調(diào)節(jié)pH=6.8±0.2；并且在發(fā)酵數(shù)小時后補充碳源。