[發明專利]一種提高乳酸菌抗酸脅迫能力的方法有效
| 申請號： | 201910023689.2 | 申請日： | 2019-01-10 |
| 公開（公告）號： | CN109628366B | 公開（公告）日： | 2020-12-29 |
| 發明（設計）人： | 張娟;楊謹華;劉為佳;朱政明;陳堅;堵國成 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N1/21 | 分類號： | C12N1/21;C12N15/74;C12N15/31;C12R1/01 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211 | 代理人： | 張勇 |
| 地址： | 214000 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 提高 乳酸菌 脅迫 能力 方法 | ||
1.二肽轉運底物結合蛋白DppA在提高乳酸乳球菌抗酸脅迫能力中的應用，其特征在于，在乳酸乳球菌中過量表達二肽轉運底物結合蛋白DppA；所述二肽轉運底物結合蛋白DppA是微生物細胞膜上用于轉運二肽的蛋白，編碼所述二肽轉運底物結合蛋白DppA的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述過量表達為先將編碼二肽轉運底物結合蛋白DppA的基因與表達載體連接以構建含有編碼二肽轉運底物結合蛋白DppA的基因的重組質粒，再將重組質粒導入乳酸乳球菌中。
3.如權利要求2所述的應用，其特征在于，所述表達載體為pNZ8148載體、pNZ8149載體、pNZ8151載體或pNZ8152載體。
4.如權利要求3所述的應用，其特征在于，所述表達載體為pNZ8148載體時，構建含有編碼二肽轉運底物結合蛋白DppA的基因的重組質粒的方法為先以Lactococcus lactisNZ9000的基因組為模板，設計引物并通過PCR擴增獲得核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的基因片段，然后將核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的基因片段與pNZ8148載體通過限制性內切酶進行雙酶切得到酶切產物，最后將得到的酶切產物進行連接，得到含有編碼二肽轉運底物結合蛋白DppA的基因的重組質粒。
5.如權利要求4所述的應用，其特征在于，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.5和SEQID NO.6所示。
6.如權利要求4所述的應用，其特征在于，所述限制性內切酶為Nco I以及Xba I。
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