[發明專利]利用試劑盒配方篩選蛋白質自組裝條件的方法

在審

• 申請號: 201910023415.3
• 申請日: 2019-01-10
• 公開（公告）號: CN109870472A
• 公開（公告）日: 2019-06-11
• 發明（設計）人: 尹大川;張托弟;王雪霆;陳亮亮;史文璞;趙風珠;鄧旭東
• 申請（專利權）人: 西北工業大學
• 主分類號: G01N23/2202
• 分類號: G01N23/2202;G01N23/22
• 代理公司: 西北工業大學專利中心 61204
• 代理人: 王鮮凱

本發明公開了一種利用試劑盒配方篩選蛋白質自組裝條件的方法，用于解決現有方法實用性差的技術問題。技術方案是首先配制蛋白質自組裝篩選試劑盒，再選擇擬實現自組裝的目標蛋白，選擇目標蛋白質的緩沖液，用所選的緩沖液配制蛋白質溶液作為蛋白質自組裝過程的溶液，選擇酶標條或96孔板作為蛋白質自組裝過程的容器，將所配制的蛋白質溶液與蛋白質自組裝篩選試劑盒中的試劑混合后加入酶標條或96孔板中，將酶標條或96孔板放入控溫箱中，定點定時取樣，利用光學顯微鏡、高分辨率掃描電鏡觀察蛋白質自組裝后的形態。本發明使用配制的蛋白質自組裝篩選試劑盒，解決了難以獲得蛋白質自組裝條件的技術問題。提升了獲得自組裝條件的能力，實用性好。

技術領域

本發明屬于生物材料領域，具體涉及一種利用試劑盒配方篩選蛋白質自組裝條件的方法。

背景技術

目前，對于蛋白質自組裝體的相關研究已有很多文獻報道。蛋白質自組裝體因形貌多樣性及其自身的穩定性等優點在食品加工及生物醫藥開發等領域有著廣泛的應用前景(Acar,H.,et al.,Self-assembling peptide-based building blocks in medicalapplications.Advanced Drug Delivery Reviews,2017.110:p.65-79.)，蛋白質自組裝體的相關研究正吸引著越來越多科學家的研究興趣和重視。然而，目前尚無一種理論或理性手段可以指導目標蛋白質發生自組裝溶液條件的配方。蛋白質自組裝體的最終實現，均有賴于恰當的自組裝溶液條件。現有研究均是基于已知可實現自組裝的溶液條件(往往是偶然的發現)基礎上，進一步開展自組裝過程的相關研究(Luo,Q.,et al.,ProteinAssembly:Versatile Approaches to Construct Highly OrderedNanostructures.Chemical Reviews,2016.116(22):p.13571-13632.)，而對于生物體這個巨型組裝體而言，蛋白質自組裝過程更是時時刻刻發生。研究蛋白質的自組裝形成的條件不但能夠揭示在蛋白質自組裝過程中蛋白質分子之間，以及蛋白質分子與其它分子之間的相互作用，而且通過進一步分析形成的蛋白質自組裝溶液條件組分，可以更精準地捕獲蛋白質自組裝過程，進而能夠實現對特定蛋白質自組裝體形成過程的有效控制，同時通過多種條件獲取不同蛋白質自組裝體，有利于拓展不同蛋白質自組裝體的應用。因此，本領域對發現新的自組裝條件提出了越來越迫切的需求。

發明內容

為了克服現有方法實用性差的不足，本發明提供一種利用試劑盒配方篩選蛋白質自組裝條件的方法。該方法首先配制蛋白質自組裝篩選試劑盒，再選擇擬實現自組裝的目標蛋白，選擇目標蛋白質的緩沖液，用所選的緩沖液配制蛋白質溶液作為蛋白質自組裝過程的溶液，選擇酶標條或96孔板作為蛋白質自組裝過程的容器，將所配制的蛋白質溶液與蛋白質自組裝篩選試劑盒中的試劑混合后加入酶標條或96孔板中，將酶標條或96孔板放入控溫箱中，定點定時取樣，利用光學顯微鏡、高分辨率掃描電鏡觀察蛋白質自組裝后的形態。本發明使用預先配制的蛋白質自組裝篩選試劑盒，分別與目標蛋白質混合，尋找蛋白質自組裝的多種條件，解決了背景技術方法難以獲得蛋白質自組裝條件的技術問題。在目標蛋白質自組裝條件未知或數量有限條件下，獲得了10-20個不同的自組裝條件，大幅提升獲得自組裝條件的能力，實用性好。

本發明解決其技術問題所采用的技術方案：一種利用試劑盒配方篩選蛋白質自組裝條件的方法，其特點是包括以下步驟：

步驟一、依據所設計的試劑盒配方表，配制蛋白質自組裝篩選試劑盒。

步驟二、選擇擬實現自組裝的目標蛋白。

步驟三、選擇目標蛋白質的緩沖液。

步驟四、用步驟三中的緩沖液配制1μg/mL-20mg/mL蛋白質溶液作為蛋白質自組裝過程的溶液。

步驟五、選擇酶標條或96孔板作為蛋白質自組裝過程的容器。