[發明專利]一株豬源降膽固醇植物乳桿菌及應用

有效

• 申請號: 201910020940.X
• 申請日: 2019-01-09
• 公開（公告）號: CN110042069B
• 公開（公告）日: 2022-10-04
• 發明（設計）人: 曹海鵬;夏品華;嚴定波;薛娟
• 申請（專利權）人: 貴州師范大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23C9/123;A61K35/747;A61P3/06;C12R1/25
• 代理公司: 北京國昊天誠知識產權代理有限公司 11315
• 代理人: 吳家偉

本申請公開了一株豬源降膽固醇植物乳桿菌及應用，所述植物乳桿菌命名為植物乳桿菌R?15(Lactobacillus plantarum R?15)；保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC M2018010，保藏日期為2018年1月8日。本發明還公開了一種上述的豬源降膽固醇植物乳桿菌在制備功能性酸奶發酵食品或者降高膽固醇血脂藥物中的應用。本發明分離的植物乳桿菌對膽鹽、模擬胃液和腸液等耐受性強，體外及小鼠體內試驗降膽固醇效果明顯，可用于降膽固醇食品或藥物的開發與研制。

技術領域

本申請屬于微生物技術領域，具體地說，涉及一株豬源降膽固醇植物乳桿菌及應用。

背景技術

膽固醇是人體內重要的生理功能物質，但含量過高會造成動脈粥樣硬化、冠心病等心腦血管疾病，嚴重威脅人類健康。我國的心血管疾病發病率較高，死亡率更是高居所有疾病首位。傳統的化學藥物治療容易反復，且成本較高，給患者和家屬帶來沉重負擔。因此，尋找更為安全、有效且成本低廉的降膽固醇藥物替代品，仍是廣大醫學和科研工作者研究的一個重點。

科學家早在1974年已經發現，長期飲用乳酸菌發酵飲品的人群體內血清膽固醇含量普遍偏低(Mann GV,Spoerry A.Studies of a surfactant and cholesteremia in theMaasai[J].Am J Clin Nutr.1974,27:464-469)。隨后，人們開始大量研究乳酸菌與體內膽固醇的關系，并證實有些乳酸菌可以降低體內膽固醇的含量。之后，相關學者開展了大量乳酸菌降膽固醇的研究工作，乳酸菌儼然成為食品和醫藥領域的降膽固醇明星。我國在該領域研究起步較晚，這些年開展了大量相關研究工作，并篩選出多株具有降膽固醇功能的乳酸菌。但這些乳酸菌的篩選，大多是建立在降解機理是膽固醇與游離膽酸共沉淀基礎之上，在含結合型膽鹽的MRS培養基中分離篩選的。而膽固醇與膽鹽水解物的共沉淀現象一般只發生在酸性環境中(pH≦5.5)(國立東,楊麗杰,霍貴成.乳酸菌降膽固醇機制的研究進展[J].食品與發酵工業.2013,39(2):117-122)。然而，人體腸道一般為中性，這種共沉淀效應在人體內很難發揮作用，限制了該類乳酸菌在腸道內的實際功效。此外，降膽固醇乳酸菌的篩選，主要以植物、食品等為原料進行的，乳酸菌在人或動物體內滯留時間和安全性，關乎其功能持效性和應用價值，有待進一步考證。

因此，尋找安全、有效，能夠直接在體內外吸收或降解膽固醇，且能在體內能夠在腸道內長期存在的乳酸菌，在降膽固醇食品或藥品開發中更具有實際意義。

發明內容

有鑒于此，本申請提供了一株豬源降膽固醇植物乳桿菌及應用。

為了解決上述技術問題，本申請公開了一株豬源降膽固醇植物乳桿菌R-15(Lactobacillus plantarum R-15)，所述植物乳桿菌保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC M2018010，保藏日期為2018年1月8日。

本發明所提供的植物乳桿菌是從貴州省某偏遠山區散養的成年豬腸道黏膜中分離出。在MRS固體培養基上培養30h時，菌落乳白、圓隆、表面光滑及乳香等特征明顯。革蘭氏染色鏡檢時，菌體呈紫色桿狀，單個、成對或鏈狀排列。生理生化特征鑒定結果：過氧化氫酶試驗、硝酸鹽還原試驗、明膠液化試驗、吲哚試驗、硫化氫試驗、葡萄糖產氣試驗、淀粉水解試驗等均為陰性。經形態學、生理生化特征及16S rDNA等綜合鑒定，菌株R-15為植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)。

經硫酸鐵銨法檢測，本發明提供的植物乳桿菌R-15能在不含膽鹽的培養基中顯著降低膽固醇的含量。經模擬胃液、腸液和膽鹽等耐受性試驗鑒定，植物乳桿菌R-15對胃液、腸液和膽鹽均具有良好的耐受性。經細胞表面疏水性試驗分析，植物乳桿菌R-15具有良好的表面疏水性。

本發明還公開了一種上述的植物乳桿菌在制備功能性酸奶發酵食品中的應用。

可選地，包括以下步驟：