[發明專利]一種PAM-SA固定化微生物降解含油廢水的方法

在審

• 申請號: 201910015363.5
• 申請日: 2019-01-08
• 公開（公告）號: CN109679871A
• 公開（公告）日: 2019-04-26
• 發明（設計）人: 陳麗華;雒曉芳;孫萬虹;王冬梅;李海玲;李安;楊一鳴
• 申請（專利權）人: 西北民族大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N11/08;C12N11/10;C02F3/34;C02F101/32;C12R1/07;C12R1/05;C12R1/38
• 代理公司: 蘭州振華專利代理有限責任公司 62102
• 代理人: 董斌

1.一種PAM-SA固定化微生物降解含油廢水的方法 ，其特征在于，其步驟為：

（1）首先進行高效降解含油廢水的微生物菌劑的制備：該菌劑從長期受石油污染的土壤中篩選，以原油為唯一碳源，通過篩選富集分離法，最終分離篩選出具有高效石油降解能力的四株菌SEQ1-BS、SEQ2-AFS、SEQ3-PSS和SEQ4-AS；

（2）將四株微生物菌株先進行復活，再擴大培養，發酵生產，備用；分離得到的4株優勢菌種分別為BS、AFS、PSS和AS；其中SEQ1-BS屬于芽孢桿菌屬，Bacillusencimensis strain encimensis、SEQ2-AFS 屬于糞產堿桿菌，Alcaligenes faecalis strain，SEQ3-PSS屬于西圖則氏假單胞菌，Pseudomonas stutzeri strain，SEQ4-AS屬于不動桿菌屬，Acinetobacter sp，將4株菌在無菌條件下分別接種至營養肉湯培養基中，在37℃恒溫培養箱中培養1天，然后按體積比1：1：1：1的比例制成一份混合菌懸液，放入37℃、150 r/ min的搖床中培養2～3 d，經平板稀釋法檢查菌落數≥10⁷個/ml，即可取出放置于4℃冰箱內備用；

（3）固定化微生物：

以聚丙烯酰胺—海藻酸鈉為載體，建立包埋固定化微生物的步驟如下：

a．將聚丙烯酰胺—海藻酸鈉加熱溶于水；

b．將該溶液與SEQ1、SEQ2、SEQ3、SEQ4微生物菌株制作的菌懸液混合均勻，使其菌落數≥10⁸個/ml；

c．將聚丙烯酰胺—海藻酸鈉與菌體混合液用針形管滴入5%-10%的CaCl₂溶液中，固定7-8h；

d．濾出顆粒，用生理鹽水洗凈，備用；

（4）每周檢測石油烴降解率、原油各組分及微生物數量，同時通過電鏡觀察固定化微生物小球的結構，直至含油廢水的石油烴含量達標。