[發(fā)明專利]含L-纈氨酸的酵母菌基復(fù)合微生態(tài)制劑及其制備方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201910014497.5 | 申請日： | 2019-01-07 |
| 公開（公告）號： | CN109527221A | 公開（公告）日： | 2019-03-29 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 呂鋒;張集匯 | 申請（專利權(quán)）人： | 呂鋒 |
| 主分類號： | A23K20/105 | 分類號： | A23K20/105;A23K10/12;A23K10/33;A23K20/189;A23K20/20;A23K20/26;A23K10/30;A23K50/75;A23K20/163 |
| 代理公司： | 北京科家知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11427 | 代理人： | 陳娟 |
| 地址： | 311115 浙江省杭州*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 復(fù)合微生態(tài)制劑 制備 酵母菌 甜菜堿 纈氨酸 動物生產(chǎn)性能 飼料添加劑 飼料轉(zhuǎn)化率 微生態(tài)平衡 微生物制品 動物機體 聯(lián)合發(fā)酵 生態(tài)環(huán)境 預(yù)防疾病 培養(yǎng)基 產(chǎn)生菌 復(fù)合菌 內(nèi)容物 菌體 無毒 生產(chǎn) | ||
1.一種含L-纈氨酸的酵母菌基復(fù)合微生態(tài)制劑，由酵母菌與L-纈氨酸產(chǎn)生菌在含有甜菜堿的培養(yǎng)基中聯(lián)合分段發(fā)酵培養(yǎng)后處理得到，其特征在于，所述復(fù)合微生態(tài)制劑含有包括L-纈氨酸在內(nèi)的胞外代謝物、包括甜菜堿在內(nèi)的發(fā)酵組分，微量元素螯合物，以及酵母菌與L-纈氨酸產(chǎn)生菌的菌體內(nèi)容物。
2.權(quán)利要求1所述的復(fù)合微生態(tài)制劑用于動物飼料添加劑。
3.權(quán)利要求1所述的復(fù)合微生態(tài)制劑的制備方法，其特征在于，主要步驟包括：
(1)配制培養(yǎng)基，甜菜堿誘導(dǎo)培養(yǎng)酵母菌種子液和L-纈氨酸產(chǎn)生菌種子液；
(2)在甜菜堿助發(fā)酵劑存在下，酵母菌與L-纈氨酸產(chǎn)生菌聯(lián)合分段發(fā)酵；
(3)發(fā)酵結(jié)束后滅菌，過濾獲得微生物菌體與含L-纈氨酸及甜菜堿的濾液，濃縮濾液；
(4)菌體內(nèi)容物提取；
(5)酶解去苦及復(fù)合氨基酸微量元素螯合物制備；
(6)滅酶，濃縮，合并含L-纈氨酸及甜菜堿的濾液，噴霧干燥，制得所述微生態(tài)制劑粉末。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，
酵母菌種子液培養(yǎng)基的組成為：復(fù)合糖化液80-100ml/L，葡萄糖20-30g/L，蛋白胨10-15g/L，酵母粉3-5g/L，甘油1-3g/L，硫酸銨0.5-1g/L，磷酸氫二鉀1-1.5g/L，氯化鈉1-2g/L，硫酸鎂0.4-0.5g/L，硫酸錳0.01-0.05g/L，甜菜堿1-3g/L，pH值5.5-6.2；
L-纈氨酸產(chǎn)生菌種子液培養(yǎng)基的組成為：復(fù)合糖化液80-100ml/L，葡萄糖15-20g/L，牛肉膏5-10g/L，大豆油1-2g/L，蛋白胨5-10g/L，酵母粉3-5g/L，硫酸氫銨0.5-0.8g/L，磷酸氫二鉀1-2g/L，氯化鈉1-2g/L，碳酸鈣2-3g/L，乙酸鈉0.5-1g/L，硫酸鎂0.4-0.6g/L，硫酸錳0.01-0.05g/L，吐溫801.0-2.5ml/L，甜菜堿1-3g/L，pH值6.5-7.0；
誘導(dǎo)培養(yǎng)過程如下：
S1：一級種子培養(yǎng)：將酵母菌和L-纈氨酸產(chǎn)生菌的菌種懸液，按照3-5％的接種量接種于含有100-200ml種子培養(yǎng)基的500-1000ml三角瓶中，28～30℃、180～200r/min搖床振蕩培養(yǎng)18～24h至對數(shù)期，得到一級種子液；
S2：搖瓶種子培養(yǎng)：將一級種子液按照10％的接種量接種到含有200-500ml種子培養(yǎng)基的1000-2000ml搖瓶中，28℃～30℃、180～200r/min搖床振蕩培養(yǎng)20～24h至對數(shù)期，獲得搖瓶種子培養(yǎng)液；
S3：種子罐培養(yǎng)：在5L種子罐中裝入種子罐體積40-50％的種子培養(yǎng)基液，然后在115℃下加熱15分鐘進行滅菌，冷卻；按10％-15％接種量將搖瓶種子接種到種子罐，培養(yǎng)溫度30～32℃，控制溶氧水平30-35％，自然pH控制，培養(yǎng)12-20h至對數(shù)期，從而得到種子液。
5.根據(jù)權(quán)利要求3-4所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，所述的復(fù)合糖化液制備方法為：
S1：將質(zhì)量比為5:1的玉米粉和大豆粉溶于去離子水中，使得玉米粉和大豆粉的總量與水的質(zhì)量體積比為1:3-4；
S2：加熱釜中在50-55℃條件下保溫浸泡90-150min后，升溫至75-85℃，繼續(xù)保溫100-120min；
S3：趁熱紗布過濾，過濾后將濾液煮沸10-15min進行糖化，隨后冷卻至室溫，添加甜菜堿至溶液質(zhì)量比為0.1-0.5wt％，從而得到復(fù)合糖化液。
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