[發明專利]頭孢羥氨芐制備方法

有效

• 申請號: 201910012708.1
• 申請日: 2019-01-07
• 公開（公告）號: CN109852660B
• 公開（公告）日: 2022-05-24
• 發明（設計）人: 薛屏;張瑋瑋;史可人;李鵬;鄭慶忠;楊金會;胡春苗
• 申請（專利權）人: 寧夏大學
• 主分類號: C12P35/04
• 分類號: C12P35/04;C12N11/14;C12N11/082;C12N9/84
• 代理公司: 寧夏合天律師事務所 64103
• 代理人: 孫彥虎

1.一種頭孢羥氨芐制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

在水浴恒溫的反應器中加入預定體積的離子液體與磷酸鹽緩沖溶液組成共溶劑；

向所述共溶劑中加入預定摩爾比的D-HPGM與7-ADCA并攪拌，其中，D-HPGM與7-ADCA的摩爾比為1:1~1:2.0；7-ADCA濃度為 0.1~1.0mol/L；

向加入了D-HPGM與7-ADCA的共溶劑中加入磁性固定化青霉素G?；?，磁性固定化青霉素G?；概c7-ADCA的質量比為1:10~1:50，持續攪拌使磁性固定化青霉素G酰化酶與D-HPGM與7-ADCA充分接觸，直至反應結束，其中控制攪拌轉速為150~250 r/min；

將反應結束的反應體系液體分層靜置，以使溶解有頭孢羥氨芐的上層磷酸鹽緩沖溶液與下層離子液體分層，用濃度6 mol/L HCl調節分離出的磷酸鹽緩沖溶液的pH 至4.0~5.5，使頭孢羥氨芐結晶析出，常規操作分離出晶體在45℃下進行干燥；

其中，所述磁性固定化青霉素G?；甘怯煤藲そY構磁性復合物微球作載體，將游離的青霉素G?；高M行固定化得到；所述磁性固定化青霉素G?；覆捎萌缦路椒ǐ@得：

核殼結構磁性復合物微球的制備：在反應釜裝入2份聚乙烯聚吡咯烷酮、3.2份NaCl和8份可溶性淀粉以及180份去離子水，攪拌下分散均勻；

于燒瓶中裝入預定量的FeCl₂·4H₂O和FeCl₃·6H₂O，其中Fe²⁺與Fe³⁺的摩爾比為1:2，加入100份去離子水機械攪拌下使其溶解，加熱40℃時滴入濃氨水調節pH為9~10后再加入0.2~0.5份油酸，升溫至90℃后恒溫2小時；

自然冷卻至室溫，加入10份苯乙烯、3份乙二醇二甲基丙烯酸酯和0.5份引發劑偶氮二異丁腈；

將燒瓶中的混合液轉移至上述反應釜中，水浴加熱反應釜至60℃攪拌下恒溫2-5小時，制備出Fe₃O₄-聚合物核體；

同反應釜中在30℃下加入0.5份 甲基丙烯酸縮水甘油酯和0.2份 N, N′-亞甲基雙丙烯酰胺，攪拌均勻后加熱至60℃恒溫3~6小時，甲基丙烯酸縮水甘油酯與N, N′-亞甲基雙丙烯酰胺在Fe₃O₄-聚合物核體表面交聯聚合，制備出表面富含環氧基的核殼復合物磁性小球；

所述磁性固定化青霉素G酰化酶的制備：稱取0.1 份上述核殼復合物磁性小球，加入經0.1 mol/L pH為7.0磷酸緩沖溶液稀釋的青霉素G酰化酶溶液，其中V_{磷酸緩沖溶液}：V_{青霉素G?；溉芤?/Sub> =2:1，混合均勻，30℃的空氣搖床振蕩反應12-24小時，搖床轉速為100-150 r/min；}

磁力作用下分離固定化酶，用磷酸鹽緩沖溶液洗3次獲得所述磁性固定化青霉素G?；?。

2.如權利要求1所述的頭孢羥氨芐制備方法，其特征在于：所述離子液體-磷酸鹽緩沖溶液共溶劑中，離子液體的質量為總溶劑質量的40%~60%，所述磷酸緩沖溶液的pH值為6.0~8.0，濃度為0.10~0.50 mol/L。

3.如權利要求1所述的頭孢羥氨芐制備方法，其特征在于：所述離子液體為1-丁基-3-甲基咪唑雙三氟甲磺酰亞胺鹽、1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸鹽、1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽、1-辛基-3-甲基咪唑六氟硼酸鹽、1-辛基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽離子液體和1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽中的任意一種。

4.如權利要求1所述的頭孢羥氨芐制備方法，其特征在于：合成所述頭孢羥氨芐的反應溫度在20~50℃；反應時間為5-15h。

5.如權利要求4所述的頭孢羥氨芐制備方法，其特征在于：合成所述頭孢羥氨芐的反應溫度在為30~40℃，反應時間為8~12h。

6.如權利要求1所述的頭孢羥氨芐制備方法，其特征在于，還包括以下步驟：磁力作用下分離磁性固定化青霉素G酰化酶，用磷酸鹽緩沖溶液沖洗，獲得所述磁性固定化青霉素G?；?。