[發明專利]基于釀酒酵母細胞壁產物誘抗活性的果實病害控制方法

在審

• 申請號: 201910012672.7
• 申請日: 2019-01-07
• 公開（公告）號: CN109645109A
• 公開（公告）日: 2019-04-19
• 發明（設計）人: 余挺;孫翠;金麗飛;林明;黃伊寧;蔡怡婷
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: A23B7/154
• 分類號: A23B7/154;C08B37/02
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司 33212
• 代理人: 金祺

1.通過誘導抗性來抑制果實采后病害的制劑，其特征在于：

該制劑是由釀酒酵母細胞壁產物和水組成；制劑中釀酒酵母細胞壁產物的質量濃度為0.1％-1％。

2.根據權利要求1所述的通過誘導抗性來抑制果實采后病害的制劑，其特征在于：

釀酒酵母細胞壁產物為釀酒酵母細胞壁β-D-1,6-葡聚糖或者釀酒酵母細胞壁(1→3)-β-D-葡聚糖。

3.根據權利要求1或2所述的通過誘導抗性來抑制果實采后病害的制劑，其特征在于：釀酒酵母細胞壁(1→3)-β-D-葡聚糖的制備方法為，包括以下步驟：

1)、將釀酒酵母細胞于振動頻率65-75Hz，時間170-190s/循環，共5個循環研磨后，得釀酒酵母細胞壁；

2)、酵母細胞壁按照1:45～55的g/mL料液比加入濃度為3±0.2％的NaOH溶液，于75±2℃下水浴處理6±1h，水浴處理期間每隔30±3分鐘搖勻一次；然后在7800±200g的條件下離心45±4min，沉淀用蒸餾水清洗；

3)、按照1:45～55的g/mL料液比向清洗后的沉淀中加入0.5±0.1mol/mL的CH₃COOH溶液，在90±5℃下水浴處理3±0.3h；于4±0.5℃，7800±200g，45±5min的條件下離心，沉淀重復上述步驟1次，得到兩次離心后的沉淀；

4)、步驟3)得到的兩次離心后的沉淀用蒸餾水清洗至pH為6.8-7.2后；于真空度0.2±0.05Pa，溫度-40±2℃，時間為36±3h的條件下冷凍干燥，得釀酒酵母細胞壁(1→3)-β-D-葡聚糖粉末。

4.根據權利要求1或2所述的通過誘導抗性來抑制果實采后病害的制劑，其特征在于：釀酒酵母細胞壁β-D-1,6-葡聚糖的制備方法為，包括以下步驟：

1)、將釀酒酵母細胞于振動頻率70±5Hz，時間180±10s/循環，共5個循環研磨后，得釀酒酵母細胞壁；

2)、酵母細胞壁按照1:50±5的g/mL料液比加入3±0.2％的NaOH溶液，于75±2℃反應6±1h，反應期間每隔30±3min搖勻一次，處理完成后經7800±200g條件下離心45±4min，沉淀用蒸餾水清洗；

3)、按照1:45～55的g/mL料液比向清洗后的沉淀中加入0.5±0.1mol/mL的CH₃COOH溶液，在90±5℃下水浴處理3±0.3h；在4±0.5℃，7800±200g，45±5min的條件下離心，沉淀重復上述步驟1次；合并兩次離心的上清液；

4)、合并后的上清液用6±0.3mol/LNaOH溶液中和至pH為6.8-7.2后，透析48±2h，于55-65℃，0.09-0.11MPa的條件下，真空濃縮至原來體積的1/4～1/2；于真空度0.2±0.04Pa，溫度-40±5℃，時間為36±3h下冷凍干燥，即得釀酒酵母細胞壁β-D-1,6-葡聚糖粉末。

5.利用如權利要求1-4任一所述的制劑進行的通過誘導抗性來抑制果實采后病害的方法，其特征在于：

將制劑接種于果實的傷口處，使制劑完全覆蓋果實傷口，待果實傷口處制劑自然風干后，將該果實放入容器中于密封狀態下保存。

6.根據權利要求5所述的通過誘導抗性來抑制果實采后病害的方法，其特征在于：

制劑接種于果實的傷口處的誘導的時間為24h。

7.根據權利要求6所述的通過誘導抗性來抑制果實采后病害的方法，其特征在于：

果實為梨、蘋果或柑橘。