[發明專利]一種pH敏感的腫瘤靶向的重組高密度脂蛋白、制備方法及應用

有效

• 申請號: 201910009327.8
• 申請日: 2019-01-04
• 公開（公告）號: CN109568271B
• 公開（公告）日: 2021-04-30
• 發明（設計）人: 李瑾;周凱;韓蒙蒙;李健飛;王倩倩;葛志名;鄒佳輝
• 申請（專利權）人: 徐州醫科大學
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K31/337;A61K31/704;A61K47/42;A61K47/24;A61K47/28;A61P35/00;C07J9/00
• 代理公司: 南京業騰知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32321
• 代理人: 李靜

本發明涉及一種pH敏感的腫瘤靶向的重組高密度脂蛋白，含如下重量份組分：1～5份抗腫瘤藥物，15～35份磷脂，15～60份白蛋白，1～10份膽固醇衍生物，2～6份亞油酸。組分中pH敏感的膽固醇衍生物有效保證了rHDL在血液循環輸送過程中的結構穩定性，提高了抗腫瘤藥物向腫瘤組織靶向輸送的效率，rHDL被腫瘤細胞攝取后，pH敏感的膽固醇衍生物中的縮醛鍵水解為原本的膽固醇，滿足了胞內ACAT酶的催化條件，借由脂蛋白結構發生變化進而實現了抗腫瘤藥物在腫瘤細胞內部的快速釋放，有效地殺傷腫瘤細胞，是一種發展潛力巨大的腫瘤靶向載體，解決了現有技術抗腫瘤藥物的生物利用度低和腫瘤殺傷選擇性低的問題。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，具體涉及一種pH敏感的腫瘤靶向的重組高密度脂蛋白及制備方法。

背景技術

目前，抗腫瘤藥物特別是脂溶性抗腫瘤藥物普遍存在生物利用度低和腫瘤殺傷選擇性低等問題，例如，紫杉醇和阿霉素，盡管其具有良好的抗腫瘤活性，但在水中的溶解度低(＜0.03g/L)，作用面廣，特異性弱，毒副作用較強，故而其口服制劑和注射制劑在臨床應用中遇到了生物利用度低和腫瘤殺傷選擇性低等問題，所以臨床治療急需一種有效方法提高脂溶性抗腫瘤藥物溶解度并減少抗腫瘤藥物的毒副作用，增加抗腫瘤藥物的腫瘤殺傷效果。

高密度脂蛋白(high density lipoprotein，HDL)是由載脂蛋白、游離膽固醇、磷脂以及非極性的脂質組成的天然生物活性物質，基于仿生學設計的重組高密度脂蛋白(reconstituted high density lipoprotein，rHDL)是采用天然HDL的脂質與蛋白成分和接近的比例重組的載藥系統，其在克服天然HDL來源稀缺、制備繁瑣、無法大規模應用等缺點的同時，更是因為其獨特的親水-疏水結構、較大的脂質核心(可作為脂溶性藥物的貯存空間)、內源性可完全降解以及不被網狀內皮系統識別和清除，并可借助其主要載脂蛋白-載脂蛋白A-I(apolipoprotein A-I，apoA-I)為腫瘤細胞所攝取等特性，在提高藥物向腫瘤組織靶向分布、增加藥效等方面顯示出獨特的優勢。

天然HDL在體內具有新生盤狀和成熟球狀兩種形態，其脂核結構恰好與藥劑學中脂質體和脂質納米粒相似，在脂核表面孵育載脂蛋白制備的rHDL即可重現天然HDL相似的結構和生理功能。考慮apoA-I受體在人體內廣泛分布，靶向特異性較差，且來源稀少，獲取較難，因此采用了腫瘤靶向性(通過增加跨內皮gp-60介導的轉運和增加與富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白的相互作用)更為突出的白蛋白代替apoA-I構建rHDL。

新生盤狀HDL在進入血液循環后，會被血液中大量存在的卵磷脂膽固醇脂酰基轉移酶(Lecithin-cholesterol acyltransferase，LCAT)催化變構為成熟球狀的HDL，這一次過程稱之為天然HDL的變構過程。如果盤狀rHDL經歷相同變構過程，其脂核包載的藥物則會大量泄漏，降低rHDL向腫瘤部位靶向輸送的效率。變構過程導致藥物泄露主要涉及兩個反應底物，其中之一即為膽固醇上的羥基，為避免rHDL在血液巡行過程中遭受LCAT酶的催化解構，可以通過化學修飾手段，使用膽固醇和正丁醛(或正己醛、PEG2000醛)反應生成的膽固醇縮醛化衍生物代替膽固醇構建載體，由于縮醛鍵的保護作用，盤狀rHDL在血液循環時程中能夠抵御LCAT酶對原本膽固醇羥基的催化進攻，切實提高載體的酶促變構穩定性，一定程度降低載體靶向輸送至腫瘤組織之前的藥物泄露。

細胞內脂質代謝則是由酰基輔酶A-膽固醇酰基轉移酶(Acyl coenzyme A-cholesterol acyltransferase，ACAT)調節的，當盤狀rHDL完成在血液中的巡行過程輸送至腫瘤組織微酸性環境(酸性條件pH5.0～6.5)后縮醛鍵可以水解釋放出膽固醇，此時腫瘤細胞內ACAT酶可對盤狀rHDL產生類似于血漿中LCAT酶的催化變構過程，伴隨變構過程發生的藥物泄漏現象，則成為有效腫瘤細胞內部藥物釋放。另外，腫瘤組織微環境為弱酸性(pH5.0-6.5)，因此，利用其比正常組織低的特性，可以構建pH敏感的rHDL，使得其可以在中性及堿性環境下穩定，而在偏酸性的環境下完成突釋，實現智能的藥物的控制釋放。現有技術中目前沒有這方面的報道。