[發(fā)明專利]一種用于水質(zhì)凈化的復(fù)合菌劑

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201910008421.1
• 申請日: 2019-01-04
• 公開（公告）號: CN109576190B
• 公開（公告）日: 2021-02-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉秋;陳帥;于基成;富洋
• 申請（專利權(quán)）人: 大連民族大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C12R1/25;C12R1/07;C02F101/16
• 代理公司: 大連智高專利事務(wù)所(特殊普通合伙) 21235
• 代理人: 祝詩洋

本發(fā)明屬于微生物環(huán)保領(lǐng)域，特別涉及一種用于水質(zhì)凈化的復(fù)合菌劑。本發(fā)明以植物乳桿菌與西姆芽孢桿菌比為2:1制備復(fù)合菌劑，具有最優(yōu)降解效果。在接種量8％時，氨氮鹽降解率為88.57％、亞硝酸鹽氮降解率為97.87％、硝酸鹽氮降解率為92.37％，能夠顯著降低水產(chǎn)養(yǎng)殖中氨氮、亞硝酸鹽氮及硝酸鹽氮等污染因子含量。有效的改善養(yǎng)殖環(huán)境，減少資源浪費。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物環(huán)保領(lǐng)域，特別涉及一種用于水質(zhì)凈化的復(fù)合菌劑。

背景技術(shù)

隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖規(guī)模化、集約化及精養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展，水體水質(zhì)凈化已成為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中一個關(guān)鍵的問題。目前，在生產(chǎn)實踐中對魚類病害的防治主要采用施用抗生素或在餌料中添加抗生素的方法，不可避免導(dǎo)致抗生素殘留問題，這也是目前水產(chǎn)品中抗生素超標(biāo)事件頻發(fā)的主要原因，嚴(yán)重影響了食品安全。此外，如何提高餌料營養(yǎng)利用率也是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)所面臨的重要課題。由于某些微生物具有拮抗活性和水體凈化作用而廣泛應(yīng)用于食品、藥品、環(huán)境等領(lǐng)域。因此，通過微生物技術(shù)，在餌料中添加某些益生菌或通過向水體中投放環(huán)境凈化微生物菌劑逐漸成為研究者和養(yǎng)殖業(yè)關(guān)注的熱點。目前復(fù)合菌凈化水質(zhì)的研究主要集中在淡水養(yǎng)殖方面，趙亮等在河蟹養(yǎng)殖中施用光合細(xì)菌比對照組氨氮和硝酸鹽氮分別降低了41.5％和41.4％一定程度改善了養(yǎng)殖水體水質(zhì)，因此，本領(lǐng)域亟需一類高降解率的復(fù)合菌劑。

發(fā)明內(nèi)容

為彌補現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種用于水質(zhì)凈化的復(fù)合菌劑。本發(fā)明的復(fù)合菌劑可有效降低養(yǎng)殖水體中氨氮、亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮等影響水質(zhì)的含氮化合物含量，改善養(yǎng)殖水體水質(zhì)。

本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：用于水質(zhì)凈化的復(fù)合菌劑，由接種量為8％的植物乳桿菌和西姆芽孢桿菌按2:1組成復(fù)合菌懸液。

所述的植物乳桿菌和西姆芽孢桿菌菌懸液按照如下步驟制備：

S1.活化菌株

配置LB和MRS固體培養(yǎng)基，制作成斜面以及平板，分別將植物乳桿菌株與西姆芽孢桿菌株用竹簽在斜面上劃線，30℃培養(yǎng)，3～7d培養(yǎng)結(jié)束后，均放在4℃中保存?zhèn)溆茫?/p>

S2.擴繁菌株

分別將活化后的植物乳桿菌株與西姆芽孢桿菌株用竹簽挑取，按8％的接種量接種于LB或MRS液體培養(yǎng)基中，30℃恒溫?fù)u床培養(yǎng)24h，得到植物乳桿菌株與西姆芽孢桿菌；

S3.菌懸液的制備

將植物乳桿菌與西姆芽孢桿菌懸液按2:1的比例倒于離心管中，10000r/min10min離心，用無菌水將其混勻，配置成分布均勻的菌懸液，顯微鏡活菌計數(shù)，使其活菌數(shù)為10⁹cfu/mL。

所述步驟S1中植物乳桿菌株與西姆芽孢桿菌株于-80℃保存。

所述LB培養(yǎng)基(g/L)：蛋白胨10.0g，氯化鈉10.0g，酵母提取物5.0g。滅菌前pH為7.2。

所述MRS培養(yǎng)基(g/L)：牛肉膏10.0g，酵母膏5.0g，蛋白胨10.0g，葡萄糖20.0g，K₂HPO₄2.0g，K₂HPO₄5.0g，MgSO₄·7H₂O0.2g，MnSO₄·4H₂O0.05g，吐溫801.0g，檸檬酸三銨2.0g。滅菌前pH為6.2～6.6。

本發(fā)明同時請求保護上述復(fù)合菌劑在水質(zhì)凈化中的應(yīng)用。將復(fù)合菌劑加入的待凈化的水體中，對水中氨氮鹽的降解率在第7d達到最高，亞硝酸鹽氮的降解率在第3天即達到最高降解率，在第10天時對水中硝酸鹽氮的降解率達到最高。