[發(fā)明專利]一種同時(shí)測(cè)定不同產(chǎn)地穿山龍藥材中四種活性成分含量的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201910004265.1
• 申請(qǐng)日: 2019-01-03
• 公開（公告）號(hào): CN109633024A
• 公開（公告）日: 2019-04-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 卜偉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇師范大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司 32200
• 代理人: 周敏

1.一種同時(shí)測(cè)定不同產(chǎn)地穿山龍藥材中四種活性成分含量的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)對(duì)照品溶液制備：分別精密稱取薯蕷皂苷、偽原薯蕷皂苷、原薯蕷皂苷、甲基原薯蕷皂苷的對(duì)照品適量，置于同一個(gè)量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，制成每1ml含1mg薯蕷皂苷、1mg偽原薯蕷皂苷、1mg原薯蕷皂苷、1mg甲基原薯蕷皂苷的對(duì)照品混合溶液；

(2)供試品溶液制備：精密稱取穿山龍藥材粉末1g，置于具塞錐形瓶中，精密加入30ml甲醇，浸泡10min，稱定重量，超聲提取3次，每次30min，放冷至室溫，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，過濾，合并提取液減壓濃縮，定容至10ml，用微孔濾膜過濾，制成供試品溶液；

(3)高效液相色譜分析：采用高效液相色譜法進(jìn)行測(cè)定，具體條件如下：色譜柱：XBridge C18，250mm×4.6mm，5μm；以乙腈為流動(dòng)相A，水為流動(dòng)相B進(jìn)行梯度洗脫，洗脫程序?yàn)椋?～5min,5％A；5～15min,5％～15％A；15～55min,15％～45％A；55～65min,45％～100％A；65～80min,100％A；流速：1.0ml/min；進(jìn)樣量：10μl；檢測(cè)波長(zhǎng)：208nm；柱溫：30℃；

(4)標(biāo)準(zhǔn)曲線制作：精密吸取對(duì)照品混合溶液5ml、2.5ml、1.25ml，分別置于10ml的量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，配制成系列對(duì)照品混合溶液0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml；按照步驟(3)的色譜條件進(jìn)樣分析，記錄色譜峰面積；以對(duì)照品混合溶液質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)(X，mg/ml)，以峰面積為縱坐標(biāo)(Y)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得薯蕷皂苷、偽原薯蕷皂苷、原薯蕷皂苷、甲基原薯蕷皂苷的回歸方程分別為：Y＝2E+06X+11088，R²＝0.9998；Y＝3E+06X+43594，R²＝0.9993；Y＝940645X+23904，R²＝0.9976；Y＝904003X+114.13，R²＝0.9946；

(5)樣品含量測(cè)定：精密吸取供試品溶液，按步驟(3)的色譜條件測(cè)定，利用步驟(4)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，用外標(biāo)法以峰面積計(jì)算薯蕷皂苷、偽原薯蕷皂苷、原薯蕷皂苷、甲基原薯蕷皂苷的含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時(shí)測(cè)定不同產(chǎn)地穿山龍藥材中四種活性成分含量的方法，其特征在于，步驟(2)中，超聲功率為250W，頻率為400kHz。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時(shí)測(cè)定不同產(chǎn)地穿山龍藥材中四種活性成分含量的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述微孔濾膜的孔徑為0.45μm。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時(shí)測(cè)定不同產(chǎn)地穿山龍藥材中四種活性成分含量的方法，其特征在于，步驟(2)中，所述穿山龍藥材粉末的粒徑為50～100目。