[發明專利]一株發光桿菌FC615及其培養方法與應用

有效

• 申請號: 201910002912.5
• 申請日: 2019-01-02
• 公開（公告）號: CN109628347B
• 公開（公告）日: 2022-07-29
• 發明（設計）人: 李福川;關靖雯;王淑敏;路丹榮
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/88;C12R1/01
• 代理公司: 濟南金迪知識產權代理有限公司 37219
• 代理人: 陳桂玲

1.一株發光桿菌Photobacterium sp. FC615，2018年12月10日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，保藏編號CGMCC NO. 16918。

2.權利要求1所述的發光桿菌FC615菌液的培養方法，其特征在于，步驟如下：

（1）取發光桿菌FC615接種至液體培養基中，在溫度為28～30℃、轉數為150～300 rpm的條件下，搖床培養8～16小時，制得種子液；

（2）取步驟（1）制得的種子液，按5～10%的體積百分比接種于液體培養基中，在溫度為28～30 ℃，溶氧為25～30%的條件下，擴大培養2～5小時，制得發光桿菌FC615菌液。

3.如權利要求2所述的培養方法，其特征在于，所述液體培養基每升組分如下：

胰蛋白胨5～15 g、酵母提取物3～8 g、海水素30~35g，水1000mL，pH值為6.5～7.5。

4.權利要求1所述的發光桿菌FC615在制備糖胺聚糖裂解酶中的應用。

5.如權利要求4所述的應用，其特征在于，步驟如下：

（1）取發光桿菌FC615菌株接種至液體培養基中，在溫度為28～30℃、轉數為150～300rpm的條件下，搖床培養 8～16小時，制得種子液；

（2）取步驟（1）制得的種子液，按5～10%的體積百分比接種于液體培養基中，在溫度為25～30℃，溶氧為25～30%的條件下，擴大培養2～5小時，加入硫酸軟骨素，使硫酸軟骨素的質量濃度為0.01～0.02%，繼續培養24～72小時，制得發光桿菌FC615發酵液；

（3）取步驟（3）制得的發光桿菌FC615發酵液，經固液分離，取液體，加入硫酸銨，使硫酸銨質量濃度大于等于80%，收集沉淀，沉淀用PBS緩沖液進行透析去除硫酸銨，制得糖胺聚糖裂解酶。

6.如權利要求5所述的應用，其特征在于，步驟（1）和（2）所述液體培養基每升組分如下：

胰蛋白胨5～15 g、酵母提取物3～8 g、海水素30~35g，水1000mL，pH值為6.5～7.5。

7.如權利要求5所述的應用，其特征在于，步驟（3）所述固液分離采用離心的方式，條件為：12,000 rpm離心15~30min。