[發明專利]一種微反應器的實時熒光檢測設備及其操作方法

在審

• 申請號: 201910001076.9
• 申請日: 2019-01-02
• 公開（公告）號: CN109406479A
• 公開（公告）日: 2019-03-01
• 發明（設計）人: 張惠丹;戴敬;丁志文;虞晨輝
• 申請（專利權）人: 蘇州昊通儀器科技有限公司;蘇州博睿義達生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N21/01
• 代理公司: 成都佳劃信知識產權代理有限公司 51266
• 代理人: 尹志敏

1.一種微反應器的實時熒光檢測設備，其特征在于，包括生物芯片、位移臺、物鏡組件、物鏡調焦裝置、濾光片組件、光源裝置、成像光路組件、探測器和計算機，

所述生物芯片中放置有微反應器，所述生物芯片放置在位移臺上且所述位移臺活動設置，所述物鏡組件放置在位移臺下方，所述物鏡調焦裝置設置在物鏡組件的下方，所述濾光片組件設置在物鏡調焦裝置的下方，所述探測器通過成像光路組件與濾光片組件連接，所述光源裝置設置在所述濾光片組件側邊，所述計算機與位移臺、物鏡調焦裝置、探測器電性連接；

所述光源裝置包括激發光源、視場光闌和第一合束鏡，所述激發光源的數量為多個，所述第一合束鏡將每個所述激發光源的光源合束并形成統一光路，所述視場光闌設置在合束后的統一光路上。

2.根據權利要求1所述的微反應器的實時熒光檢測設備，其特征在于，所述微反應器帶有熒光特性，所述微反應器的結構包括油包水液滴結構、水包油液滴結構、微孔陣列結構和腔體結構。

3.根據權利要求1所述的微反應器的實時熒光檢測設備，其特征在于，所述位移臺內設置有用于控制生物芯片溫度的加熱裝置。

4.根據權利要求1所述的微反應器的實時熒光檢測設備，其特征在于，所述物鏡組件、物鏡調焦裝置、濾光片組件和光源裝置組成照明光路，所述生物芯片、位移臺、物鏡組件、物鏡調焦裝置、濾光片組件、成像光路組件和探測器組成成像光路。

5.根據權利要求4所述的微反應器的實時熒光檢測設備，其特征在于，所述濾光片組件包括二向色鏡和兩個濾光片，兩個所述濾光片分別對應照明光路和成像光路。

6.根據權利要求4所述的微反應器的實時熒光檢測設備，其特征在于，所述濾光片組件為多組，每組所述濾光片組件分別與一激發光源對應。

7.根據權利要求1所述的微反應器的實時熒光檢測設備，其特征在于，所述激發光源為四組，每組所述激發光源包括激光器和準直透鏡，所述激光器與準直透鏡匹配設置，所述準直透鏡將所述激光器的光線準直。

8.根據權利要求1所述的微反應器的實時熒光檢測設備，其特征在于，所述激發光源為四組，每組所述激發光源四組包括第二激發光源，每組所述第二激發光源包括激光器、準直透鏡和若干個第二合束鏡，所述激光器與準直透鏡匹配設置，所述第二合束鏡用于將每個激光器的光束合束。

9.根據權利要求1所述的微反應器的實時熒光檢測設備，其特征在于，所述物鏡調焦裝置具有自動調焦功能。

10.一種權利要求1至9所述的微反應器的實時熒光檢測設備的操作方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一：將處理好樣本打進生物芯片1里，并且用介質稀釋，保證微反應器不上下重疊，然后把芯片放置在位移臺2上，所說的微反應器帶熒光染料。

步驟二：根據微反應器里面所加的熒光染料，選擇相應的激發波長和濾光片組件。

步驟三：打開探測器，通過物鏡組件選擇合適倍率的物鏡。

步驟四：啟動自動對焦功能，先后在邊緣和對角線的位置上找到12個點，用計算機對焦算法得到最清晰的圖像記錄物鏡的12個位置，用自小二乘法計算得到物鏡的初始位置。

步驟五：通過調節位移臺的位置，使得需要計數的微反應器放置在探測器8的拍攝區域；

步驟六：選擇相應的曝光時間，拍攝圖片。

步驟七：當拍攝區域大于探測器一次可拍攝的范圍時，運用圖像拼接的功能拍攝完成的圖像；

步驟八：完成測試后，進行后續的圖像處理和微反應器的計數，統計陰性和陽性的微反應器個數，并計算濃度。

步驟九：根據拍攝的范圍選擇不同的物鏡倍率，或者根據熒光染料選擇不同的激發光源，然后重復以上步驟三～八可拍攝相應的微反應器圖像。