[發明專利]抗BCMA單鏈抗體scFv及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201880098546.1
• 申請日: 2018-10-10
• 公開（公告）號: CN112805302B
• 公開（公告）日: 2023-01-31
• 發明（設計）人: 王媚娘;歐陽冰潔;楊乃波;姜琳;任丙昭;柳陽;趙正琦;李波;侯勇;王飛;葛玉萍;董旋
• 申請（專利權）人: 深圳華大生命科學研究院
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/62;C12N5/10;A61K35/17;A61P35/00
• 代理公司: 深圳鼎合誠知識產權代理有限公司 44281
• 代理人: 李小焦;彭家恩

提供一種抗BCMA單鏈抗體scFv及其制備方法，包括結合定點突變和隨機突變技術人工合成了靶向BCMA的噬菌體展示庫，結合噬菌體展示技術，獲得3株靶向BCMA抗原的新型scFv株，可作為靶向BCMA的抗體。

技術領域

本發明涉及抗體技術領域，具體涉及一種抗BCMA單鏈抗體scFv及其制備方法和應用。

背景技術

在過去的幾年里，過繼性T細胞免疫治療已經成為癌癥免疫治療中最有希望的策略之一。CAR-T療法自誕生起就引起了研究人員的極大關注，尤其在2011年用于白血病晚期病人治療中取得了巨大的成功，2012年對約80％的淋巴瘤實現緩解后，得到了飛速的發展。目前的CAR-T療法主要以第二代CAR為主，治療手段為從患者體內分離出T細胞，使用工程化的手段讓T細胞裝備上具有基因修飾的嵌合抗原受體(CAR)，CAR是復合膜受體分子，包括細胞外和胞內兩個功能部分，同時具有特異性定位到靶標分子和活化T細胞的功能。CAR的胞外部分是抗體單鏈可變片段組成的重組受體(scFv)，通過scFv介導，以抗原抗體特異性結合的方式特異性定位到靶分子，激活T細胞，從而發揮腫瘤殺傷作用。

在治療血液病的成功后，人們開始將目光轉向實體瘤領域，包括多發性骨髓瘤，乳腺癌，前列腺癌，卵巢癌，膠質瘤，結直腸癌，肝轉移，間皮瘤，腎癌，肉瘤，神經細胞癌和胸膜間皮瘤等。2017年被稱為細胞治療元年，法國生物技術公司Cellectis在3月宣布其研究開發的通用型CAR-T療法UCART123獲得了美國FDA研究型新藥(IND)一期臨床試驗批準，這是FDA批準的全球首個以CD123為靶點的同種異體方法的CAR-T臨床試驗；同年8月，美國FDA批準了Novartis的靶向CD19的CAR-T產品Kymriah，10月，Kite的用于特定類型的大B細胞瘤成人患者治療的產品Yescarta的上市，這些成果極大地推動了研究者對于細胞免疫治療研發的熱情。作為免疫治療的最新技術，CAR-T可應用的范圍廣，前景廣闊，預計CAR-T在中國的市場價值超過1000億。

B細胞成熟抗原(B Cell Maturation Antigen，BCMA，CD269)是腫瘤壞死因子受體(TNFR)超家族的成員，是由185個氨基酸組成的非糖基化的III型整合膜蛋白。BCMA結合B細胞激活因子(BAFF，也稱BLys，THANK，TALL-1)和增殖誘導配體(APRIL)，在管理B細胞的成熟和B細胞分化成漿細胞的過程中扮演著至關重要的角色。研究表明，BCMA的過表達會引起蛋白激酶B、MAPK和NF-κB信號的產生，從而增強骨髓瘤細胞的增殖和存活。BCMA最早發現于成熟的B淋巴細胞表面，在其他組織細胞中幾乎不表達，而在惡性增殖的B淋巴細胞(例如骨髓瘤細胞、白血病細胞)中高度表達，并介導的下游信號通路，對細胞的存活、增殖、轉移和耐藥中起著關鍵性的作用，這些特性使得它成為用于診斷和免疫治療多發性骨髓瘤(Multiple Myeloma，MM)的一個新的藥物靶點。