[發明專利]治療乙型肝炎病毒（HBV）感染的方法

在審

• 申請號: 201880092195.3
• 申請日: 2018-09-27
• 公開（公告）號: CN112367993A
• 公開（公告）日: 2021-02-12
• 發明（設計）人: A·薩爾維蒂;D·杜蘭特;H·夏布勒;T·拉爾利;D·格里森;B·查博特
• 申請（專利權）人: INSERM（法國國家健康醫學研究院）;里昂克羅德·貝爾那大學-里昂第一大學;法國國家科學研究中心（CNRS）;利昂貝拉爾中心;英屬哥倫比亞大學;健康與人類科學公司
• 主分類號: A61K31/4439
• 分類號: A61K31/4439;A61P31/20
• 代理公司: 北京英創嘉友知識產權代理事務所(普通合伙) 11447
• 代理人: 桑傳標

在本發明中，人類肝細胞核中HBc相互作用因子的蛋白質組學鑒定揭示了大部分RNA結合蛋白(RBPs)參與mRNA代謝，并且特別是發現了富含絲氨酸/精氨酸的剪接因子10(SRSF10)在HBc復合物中富集了近3000倍。發明人證明，用小分子1C8(4?吡啶酮苯并噻唑咪唑甲酰胺)抑制SRSF10磷酸化，可在持續感染的肝細胞中強烈抑制HBV復制(基因型C和D)，以及在新生感染中強烈抑制HBV cccDNA的建立。因此，本發明涉及一種用于治療乙型肝炎病毒(HBV)感染的SRSF10活性抑制劑，所述抑制劑將SRSF10保持在去磷酸化狀態，并防止或降低SRSF10的剪接活性。

發明領域

本發明涉及使用SRSF10(富含絲氨酸/精氨酸的剪接因子10)的生物活性抑制劑治療乙型肝炎病毒感染的方法和藥物組合物，特別是所述抑制劑使SRSF10保持在去磷酸化狀態，并阻止或降低SRSF10的剪接活性。

發明背景

盡管存在預防性疫苗，但慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染在世界范圍內仍然是主要健康問題，因為它們涉及2.5億人口，并且表現為原發性肝癌(肝細胞癌，HCC)的首要誘因(Petruzziello，2018)。目前臨床上公認的針對HBV慢性感染的抗病毒治療包括直接靶向由病毒DNA轉錄并間接增強宿主免疫反應的聚乙二醇化干擾素-α(IFN-α和/或特異性抑制HBV逆轉錄的核苷類似物(NUC)。這些治療通常會導致患者血液中的病毒血癥短暫降低(針對IFN)或持久降低(針對NUC)(Zoulim和Durantel，2015)。然而，很少取得肝臟病毒的清除，因此必須使用NUC進行終身治療。因此，迫切需要開發能夠直接或間接抑制HBV復制的新型抗病毒分子，這些抗病毒分子可用于組合療法。

在高度復制HBV的細胞中，HBV核心蛋白(HBc)積聚在細胞核中，這意味著，除了眾所周知的其在pgRNA的衣殼化和隨后的逆轉錄產生病毒粒子基因組中的作用外，HBc可能還具有其他調控功能。早期研究表明，HBc與HBV cccDNA以及細胞DNA結合(Zlotnick等，2015)。這些發現表明，該病毒蛋白可通過招募表觀遺傳調控因子和/或阻止接近沉默因子來調節病毒微型染色體(cccDNA)的表達。然而，最近的研究表明，新合成的HBc并非HBV轉錄本身所需。因此，HBc的細胞核功能仍然不明確(Seeger等，2015)。

為了破譯HBc的細胞核功能，發明人鑒定了其在人類分化的肝細胞中的細胞核伙伴。對人類肝細胞核中的HBc相互作用因子的蛋白質組學鑒定揭示了大多數RNA結合蛋白(RBPs)參與mRNA的代謝。特別地，發現了富含絲氨酸/精氨酸的剪接因子10(SRSF10)在HBc復合物中富集了近3000倍，因此突出了HBc與該核RNA結合因子的強且優先的相互作用。

為了進一步研究SRSF10在HBV復制過程中的作用，發明人使用了化合物1C8(4-吡啶酮苯并異噻唑甲酰胺(4-pyridinonebenzisothiazole carboxamide))，該化合物最近被確定為HIV-1復制的強抑制劑(Shkreta等，2017)。1C8最初被鑒定為IDC16的結構模擬物，IDC16是一種抑制主要SR因子SRSF1剪接功能的藥物(Cheung等，2016)。分子分析表明，1C8并不抑制SRSF1，而是阻止SRSF10的磷酸化，從而調節其剪接活性(Shkreta等，2017)。特別地，1C8被揭示可抑制SRSF10在絲氨酸133的磷酸化。此殘基的磷酸化以及絲氨酸131發生的磷酸化先前被發現會改變與其他剪接因子的相互作用(Shkreta等，2017)。體外研究表明，1C8強烈抑制HIV復制，而對細胞基因和細胞活力的影響很小。

HIV復制的抑制與剪接的病毒mRNA合成的改變有關并且與SRSF10和HIV mRNAs的結合減少有關(Shkreta等，2017)。專利申請WO2015/164956公開了苯并異噻唑衍生物化合物(屬于1C8)及其在治療HIV感染中的用途。

發明內容