[發明專利]具有改善的熱穩定性和對阿拉伯木聚糖增加的酶活性的新木聚糖酶

在審

• 申請號: 201880089744.1
• 申請日: 2018-11-22
• 公開（公告）號: CN112074602A
• 公開（公告）日: 2020-12-11
• 發明（設計）人: S·格勞布納;V·茲韋爾洛夫;W·施瓦茨;W·豪夫;B·安德烈森;L·P·舒爾特;W·利布爾
• 申請（專利權）人: 慕尼黑工業大學
• 主分類號: C12N9/24
• 分類號: C12N9/24;D21C5/00;D21H17/00;A23K10/14
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 王健

1.一種多肽，其包含與根據SEQ ID NO:2或3、優選SEQ ID NO:3的多肽具有至少75％的氨基酸序列相同性的多肽或由與根據SEQ ID NO:2或3、優選SEQ ID NO:3的多肽具有至少75％的氨基酸序列相同性的多肽組成，其中所述多肽具有木聚糖酶活性，并且前提條件是所述多肽不是SEQ ID NO:1的多肽；其特征在于，與SEQ ID NO:1的多肽相比，所述多肽顯示出改善的熱穩定性和/或耐酸處理性和/或增加的酶活性，其中

-改善的熱穩定性意指所述多肽顯示出70℃或更高的Tm_on，和/或顯示出80℃或更高的Tm₅₀，和/或顯示出80℃或更高的Tm；

-改善的耐酸處理性意指在低pH，諸如2.5至5.5的pH處理后保留至少70％的酶活性；且

-增加的酶活性意指酶比活增加至少1.6倍。

2.根據權利要求1所述的多肽，其中所述多肽包含與SEQ ID NO:3的多肽具有至少75％的氨基酸序列相同性的多肽或由與SEQ ID NO:3的多肽具有至少75％的氨基酸序列相同性的多肽組成，并且其中所述SEQ ID NO:3的多肽顯示出1.6倍的酶比活性增加和81.2℃的Tm_on和/或85.7℃的Tm₅₀。

3.根據權利要求1或2所述的多肽，其中所述多肽在5.5至9.5的pH范圍內和/或在37℃至80℃的溫度范圍內顯示出至少40％的酶活性，特別是木聚糖酶活性。

4.根據權利要求1至3中任一項所述的多肽，其中在2.0至5.5的pH范圍內酸處理所述多肽之后保留所述酶活性。

5.一種核酸分子，其由編碼根據SEQ ID NO:2或3的多肽的SEQ ID NO:9或10的核酸序列組成。

6.一種表達載體，其包含權利要求5所述的核酸分子。

7.一種宿主細胞，其包含權利要求5所述的SEQ ID NO:9或10的核酸序列或者權利要求6所述的表達載體，其中所述宿主細胞表達根據SEQ ID NO:2或3的多肽。

8.一種產生SEQ ID NO:2或3、優選SEQ ID NO:3的多肽的方法，所述方法包括在允許產生所述多肽的條件下培養權利要求7所述的宿主細胞，并從培養物中回收所述多肽。

9.一種組合物，其用于添加到生物質或含半纖維素的材料中，所述組合物包含權利要求1所述的多肽，和任選包含至少一種配制劑、賦形劑、穩定劑和/或防腐劑。

10.根據權利要求9所述的組合物，其中所述組合物是液體制劑諸如溶液或懸浮液，或干燥制劑諸如粉末或顆粒。

11.根據權利要求9或10所述的組合物，其中所述組合物包含作為熱穩定劑的糖，所述糖例如選自蔗糖、海藻糖、山梨糖、松三糖、毛蕊花糖、蜜二糖、三氯蔗糖或棉子糖，或者當所述組合物是液體制劑時，包含溶劑，諸如甘油或水。

12.根據前述權利要求中任一項所述的多肽或組合物，其中所述多肽改變半纖維素組分的含量，特別是木聚糖含量，以使例如致密結構松弛或降低生物質或含半纖維素的材料的高粘度。

13.根據前述權利要求中任一項所述的多肽或組合物在生產動物飼料、紙漿和紙、生物能以及在釀造或麥芽制造中的用途。