[發(fā)明專利]腺相關(guān)病毒變體衣殼和用于抑制血管生成的應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201880087687.3
• 申請日: 2018-11-26
• 公開（公告）號: CN111770999A
• 公開（公告）日: 2020-10-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: D.柯恩;M.科特曼;D.謝弗;P.什曼斯基;P.弗蘭西斯
• 申請（專利權(quán)）人: 4D分子治療有限公司
• 主分類號: C12N15/864
• 分類號: C12N15/864;C12N15/13;C07K14/015;A61K39/395;A61K9/00;A61P27/02;A61P27/06;A61P9/10;A61P35/00
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 羅文鋒;李唐

1.一種重組腺相關(guān)病毒(rAAV)病毒粒子，其包含(a)變體腺相關(guān)病毒(AAV)衣殼蛋白，所述變體腺相關(guān)病毒(AAV)衣殼蛋白相對于相應(yīng)的親本AAV衣殼蛋白包含在所述衣殼蛋白的GH環(huán)中的肽插入，其中所述肽插入包含氨基酸序列ISDQTKH(SEQ ID NO:14)，和(b)異源核酸，其包含編碼抑制血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的活性的多肽的核苷酸序列，其中所述核苷酸序列選自由下述組成的組：

(i)SEQ ID NO:69(sc-雷珠單抗-LH1)所示的核苷酸序列，

(ii)SEQ ID NO:65(阿柏西普)所示的核苷酸序列，

(iii)SEQ ID NO:74(溴珠單抗)所示的核苷酸序列，

(iv)SEQ ID NO:67(sc-雷珠單抗-HL)所示的核苷酸序列，

(v)SEQ ID NO:70(sc-雷珠單抗-LH2)所示的核苷酸序列，

(vi)SEQ ID NO:72(sc-雷珠單抗-LH-Fc)所示的核苷酸序列，

(vii)SEQ ID NO:76(溴珠單抗-Fc)所示的核苷酸序列，和

(viii)與(i)-(vii)中任一個具有至少90％、至少95％、至少98％或至少99％同一性的核苷酸序列。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的rAAV，其中所述肽插入包含氨基酸序列Y₁Y₂ISDQTKHY₃，其中Y₁-Y₃中的每一個獨立地選自Ala、Leu、Gly、Ser、Thr和Pro。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的rAAV，其中所述肽插入包含氨基酸序列LAISDQTKHA(SEQ IDNO:28)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項所述的rAAV，其中插入位點位于對應(yīng)于AAV2的VP1(SEQID NO:2)的氨基酸587和588的氨基酸之間或在另一AAV血清型的衣殼蛋白中的相應(yīng)位置。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項所述的rAAV，其中所述衣殼蛋白包含相對于AAV2的VP1衣殼(SEQ ID NO:2)的一個或多個氨基酸取代或在另一AAV血清型中的一個或多個相應(yīng)取代。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項所述的rAAV，其中所述衣殼蛋白包含相對于AAV2的VP1衣殼(SEQ ID NO:2)的P34A氨基酸取代或在另一AAV血清型中的相應(yīng)取代。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6中任一項所述的rAAV，其中所述衣殼蛋白包含(i)氨基酸序列ISDQTKH(SEQ ID NO:14)和(ii)P34A氨基酸取代，并且與SEQ ID NO:42所示的序列具有至少90％同一性、至少95％同一性或至少99％同一性。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的rAAV，其中所述衣殼蛋白基本上由SEQ ID NO:42所示的氨基酸序列組成。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的rAAV，其中所述核苷酸序列與SEQ ID NO:69(sc-雷珠單抗LH)所示的序列的全長或與SEQ ID NO:69的核苷酸61-1578具有至少90％同一性、至少95％同一性、至少98％同一性、至少99％同一性或100％同一性，并且編碼SEQ ID NO:71所示的氨基酸序列或編碼SEQ ID NO:71的氨基酸21-525的氨基酸序列。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的rAAV，其中所述核苷酸序列包含SEQ ID NO:69的核苷酸61-1578，并且優(yōu)選包含SEQ ID NO:69的核苷酸1-1578。