[發明專利]用于檢測和/或定量樣品中的分析物的微膠囊

在審

• 申請號: 201880084693.3
• 申請日: 2018-12-19
• 公開（公告）號: CN111542754A
• 公開（公告）日: 2020-08-14
• 發明（設計）人: 托馬斯·艾林戈;斯蒂芬·胡博得;伊萬·倫卡維克;托爾斯泰·舒爾茨;凱瑟琳·斯蒂爾莫茨;云根·恩爾曼川特;莉亞·坎茨;奧利沃·萊姆茨
• 申請（專利權）人: 布林克公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 北京安杰律師事務所 11627
• 代理人: 楊劍;吳立

本發明涉及用于檢測和/或定量樣品中的分析物的微膠囊。此外，本發明涉及使用所述微膠囊檢測和/或定量樣品中的分析物的方法。此外，本發明涉及用于檢測和/或定量樣品中的分析物的微膠囊的制備方法。

技術領域

本發明涉及用于檢測和/或定量樣品中的分析物的微膠囊。此外，本發明涉及使用所述微膠囊檢測和/或定量樣品中的分析物的方法。此外，本發明涉及用于檢測和/或定量樣品中的分析物的微膠囊的制備方法。

背景技術

存在大量技術可用于檢測樣品中的分析物或定量分析物濃度的小量差異。特別地，這些技術也已被用于多路測定法格式中。例如，在Fulton等Clinical Chemistry,1997,43(9)；pp.1749-1756中公開了一種多路數據獲取和分析平臺，用于執行多達64種不同分析物的同時測量的基于微球的測定法的流式細胞術分析。為了檢測樣品中的單個分析物或定量分析物濃度的小量差異，已建立了數字分析技術(Witters等，Lab.Chip,2014,14(17)；pp.3225-3232)。為了提供針對特定生物化學反應的限定約束，已建立了乳化技術并將其用于建立數字檢測方案(Kanagal-Shamanna,Methods Mol.Biol.,2016,1392；pp.33-42)。這些測定法的質量在相當大程度上取決于所述乳液的穩定性。為此目的，已將提供在非水性相中的某些乳化劑與油包水乳液的水性相中的牛血清白蛋白(BSA)的組合用于形成具有蛋白質外皮的液滴(參見US 2011/0217711 A1)。這種方法也已在Hindson等(Anal.Chem.,2011,83(22)；pp.8604-8610)中使用。在這種方法中，將包括BSA在內的PCR試劑與稀釋的水性樣品混合，并使用微流體裝置以便產生水性液滴在含有適合乳化劑的氟碳油中的乳液。在加熱至95℃后，在所述液滴周圍形成外皮，并在隨后用于核酸擴增的熱循環步驟期間提供了防止聚結的保護作用。實際的外皮形成效應早已為人所知，并且也已被用于生產用于藥物遞送或作為食品添加劑的微膠囊(Acton等，Journal of Food Science,1972,37(5)；pp.795-796和Gires等，J.Mech.Behav.Biomed.Mater.,2016,58,pp.2-10)。

微膠囊也已被用于進行高度平行的單個聚合酶鏈反應(Mak等，AdvancedFunctional Materials 2017,18(19)；pp.2930-2937)。通過膠囊化技術中的基質輔助的逐層組裝(LbL)，在具有包埋和溶解的試劑包括待擴增的靶的瓊脂糖凝膠粒子上構建了具有選擇性可滲透膠囊壁的溫度穩定的微膠囊(Bai等，angewandte Chemie,2017,122(30)；pp.5316-5320)。在這種方法中，在聚合酶鏈反應期間，小分子量的構件例如核苷酸(dNTP)從外部供應并通過所述可滲透膠囊壁擴散到內部，使得在PCR期間得到的高分子量PCR產物積累在所述微膠囊內。

所有前述技術要么需要液滴的原位產生，要么難以進行，需要建立精心設計的方案。此外，得到的膠囊不可儲存，或者它們難以操控，并且需要遵循精心設計的流程。因此，在本領域中，對允許容易地制造、儲存和使用用于檢測和/或定量樣品中的分析物的微膠囊的改進的方法，存在著需求。在本領域中，對提供用于檢測分析物的預制的并允許用于預制的試劑的膠囊，也存在著需求。此外，在本領域中，對提供預制的允許捕獲分析物的膠囊，存在著需求。

發明內容

因此，第一方面，本發明涉及一種用于檢測和/或定量樣品中的分析物的微膠囊，所述微膠囊包含

●能夠在待檢測和/或定量的分析物存在下產生和/或放大信號的試劑；其中所述試劑處于干燥狀態；

●圍繞所述試劑的多孔基質，所述多孔基質具有接納待檢測和/或定量的分析物的手段；其中所述干燥狀態試劑通過屏障，例如至少一個包圍所述試劑的屏障層與所述多孔基質分隔開。

在一個實施方式中，所述接納待檢測和/或定量的分析物的手段是尺寸適合于容納含有所述分析物的液體樣品的間隙孔隙。