[發明專利]使用CROF和機器學習的基于圖像測定的系統和方法

在審

• 申請號: 201880083333.1
• 申請日: 2018-10-26
• 公開（公告）號: CN112689757A
• 公開（公告）日: 2021-04-20
• 發明（設計）人: 斯蒂芬·Y·周;丁惟;周蕪;田軍;張越成;吳明權;李力;邁克爾·萊昂利
• 申請（專利權）人: ESSENLIX公司
• 主分類號: G01N33/50
• 分類號: G01N33/50
• 代理公司: 北京百歐知識產權代理事務所(普通合伙) 11930
• 代理人: 吳泳歷

1.一種用于計數樣品中的細胞的設備，其包含：

(a)樣品保持器，其包含第一板、第二板和間隔件，第一板、第二板和間隔件，其中：

i.所述板可相對于彼此移動成不同的構造；

ii.一個或兩個板是柔性的；

每個所述板在其相應的表面上具有用于接觸含有或疑似含有待計數的細胞的樣品的樣品接觸區域，

iii.一個或兩個板是透明的；

iv.所述板中的一個或兩個包含與相應的樣品接觸區域固定的間隔件，其中所述間隔件具有柱形形狀、基本上平坦的頂部表面，以及預定的基本上均勻的高度，其中所述間隔件中的至少一個在所述樣品接觸區域內，并且其中所述間隔件的楊氏模量乘以所述間隔件的填充因子等于或大于2MPa；

其中所述填充因子是間隔件接觸面積與總板面積的比率；

其中所述構造中的一個是開放構造，其中，所述兩個板是分開的，所述板之間的間距不通過所述間隔件調節，并且所述樣品沉積在所述板中的一個或兩個上；以及

其中所述構造中的另一個是閉合構造，所述閉合構造在樣品在所述開放構造中沉積之后配置；以及在所述閉合構造中，所述樣品的至少一部分通過所述兩個板壓縮為均勻厚度為200μm或更小的薄層，其中所述層的均勻厚度通過所述板的樣品接觸表面限制并且通過所述板和所述間隔件調節；

(b)成像器，其被配置為對著所述樣品的區域(感興趣的區域AOI)；以及

(c)包含計算機程序的計算機可讀存儲介質或存儲器儲存單元，其中所述計算機程序包含用于計數細胞的機器學習和圖像處理的算法，并且其中所述算法在分析中使用所述間隔件的圖像，用于檢測或計數細胞。

2.一種用于計數樣品中的細胞的方法，包含：

(q)接收含有或疑似含有待檢測和計數的細胞的樣品；

(r)將所述樣品添加到樣品保持器，使所述樣品形成薄層；

(s)使用成像器對樣品保持器中的樣品的區域(感興趣的區域AOI)進行成像；

(t)分析(c)中的所述圖像以檢測和/或計數細胞；其中所述分析包含用于計數細胞的機器學習和圖像處理的算法，并且其中所述算法在分析中使用所述間隔件的圖像，用于檢測或計數細胞；

其中所述樣品保持器包含第一板、第二板和間隔件，其中：

i.所述板可相對于彼此移動成不同的構造；

ii.一個或兩個板是柔性的；

iii.所述板中的每個在其相應的表面上具有用于接觸含有或疑似含有待計數的細胞的樣品的樣品接觸區域，

iv.一個或兩個板是透明的；

v.所述板中的一個或兩個包含與相應的樣品接觸區域固定的間隔件，其中所述間隔件具有柱狀形狀、基本上平坦的頂部表面，以及預定的基本上均勻的高度，其中所述間隔件中的至少一個在所述樣品接觸區域內，并且其中所述間隔件的楊氏模量乘以所述間隔件的填充因子等于或大于2MPa；

其中所述填充因子是間隔件接觸面積與總板面積的比率；

其中所述構造中的一個是開放構造，其中，所述兩個板是分開的，所述板之間的間距不通過所述間隔件調節，并且所述樣品沉積在所述板中的一個或兩個上；以及

其中所述構造中的另一個是閉合構造，所述閉合構造在樣品在所述開放構造中沉積之后配置；以及在所述閉合構造中，所述樣品的至少一部分通過所述兩個板壓縮為均勻厚度為200μm或更小的薄層，其中所述層的均勻厚度通過所述板的樣品接觸表面限制并且通過所述板和所述間隔件調節。

3.如以上任一權利要求所述的設備和方法，其中所述細胞是血細胞。

4.如以上任一權利要求所述的設備和方法，其中所述成像能夠對所述樣品區域的局部區域成像。

5.如以上任一權利要求所述的設備和方法，其中，其進一步包含分析檢測的細胞的細胞位置、計數、濃度的步驟。

6.如以上任一權利要求所述的方法，進一步包含使用預測來生成熱圖。

7.如以上任一權利要求所述的方法，進一步包含將所述血細胞的中心位置、計數和濃度儲存在儲存裝置中的步驟。