[發明專利]細胞培養裝置，培養液抽吸器及細胞培養方法

在審

• 申請號: 201880083261.0
• 申請日: 2018-12-21
• 公開（公告）號: CN111868224A
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: 山浦順司;桑江忍;豐田太郎;小長谷周平
• 申請（專利權）人: 國立大學法人京都大學;武田藥品工業株式會社
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所 11494
• 代理人: 封新琴

本發明提供一種細胞懸浮培養裝置，其為適于細胞的大量培養的細胞懸浮培養裝置，該細胞培養裝置包括培養液抽吸器和懸浮培養槽，所述培養液抽吸器具有由外管及插入該外管的內腔中的內管構成的二重管構造的培養液抽吸器，所述培養液抽吸器中，所述外管具備使培養液通過的過濾器，所述內管具備通過所述過濾器的培養液的吸入口，所述外管的向所述懸浮培養槽插入的方向的遠位設有連通該外管的內腔與外部的氣孔。

技術領域

本發明涉及細胞培養裝置、培養液抽吸器及細胞培養方法。

發明背景

為了將胚胎干細胞(ES細胞)及人工多能性干細胞(iPS細胞)等多能性干細胞(pluripotent stem cell)用于再生醫療的臨床應用，需要將使用培養皿、燒瓶等的實驗室培養方法在量上加以擴大(放大)，并開發能夠大量并且低成本地制造一定以上的品質的細胞的培養裝置。為確立細胞的大量培養方法，氧供給和培養液更換的效率化是重要的，通過減少生長因子的使用量等來實現低成本是人們所追求的。

作為細胞的培養方法，有在經細胞外基質、飼養細胞等包被的培養器表面使細胞粘附進行培養的粘附培養，以及在培養液中使細胞懸浮而進行培養的懸浮培養(懸濁培養)。在粘附培養中，細胞的最大產量取決于培養面積，但在懸浮培養中，細胞的最大收量依賴于培養液體積。因此，懸浮培養對于放大而言是有利的。

多能性干細胞等細胞在懸浮培養的情況下會形成聚集體。非專利文獻1中公開了用旋轉瓶攪拌培養液，以在抑制過剩的細胞聚集的同時不會由于培養液流產生的剪切應力引起細胞死亡，由此使多能性干細胞穩定增殖的技術。

現有技術文獻

非專利文獻

非專利文獻1Olmer R el al.,Suspension culture of human pluripotentstem cells in controlled,stirred bioreactors.,Tissue Eng.Part.C Methods,2012,18(10):772-84。

發明內容

發明要解決的課題

實驗室的培養方法中的培養液的更換，是通過離心分離等將細胞與培養液分離，將分離的細胞重懸于新鮮的培養液中從而進行的。然而，利用懸浮培養進行的大量培養中，離心分離等的細胞分離操作的實施是困難的，因此通過使細胞的聚集體自然沉降而將細胞與培養液分離來更換培養液。對于這樣的培養液更換，需要短時間停止培養液的攪拌令細胞自然沉降，不但費事，并且這段時間內也有細胞增殖、細胞性質不穩定化及不均一化之虞。

本發明的主要目的是提供適于細胞的大量培養的細胞懸浮培養裝置。

用于解決課題的手段

為了解決上述課題，本發明提供以下的[1]～[4h]。

[1]細胞培養裝置，其包括培養液抽吸器和懸浮培養槽，所述培養液抽吸器具有由外管及插入該外管的內腔中的內管構成的二重管構造，

在所述培養液抽吸器中，

所述外管具備使培養液通過的過濾器，

所述內管具備通過所述過濾器的培養液的吸入口，

在所述外管的向所述懸浮培養槽插入的方向的遠位設有連通該外管的內腔與外部的氣孔。

[1a]根據[1]所述細胞培養裝置，其中當配置所述培養液抽吸器使得所述過濾器位于其下方時，所述氣孔設置于所述吸入口的上方。

[1b]根據[1]或[1a]的細胞培養裝置，其中所述內管的向所述懸浮培養槽插入的方向的前端構成所述吸入口，相反端的管口與泵連接。