[發明專利]包括視網膜下遞送治療有效量的重組AAV9衍生載體的在對象的視錐細胞光感受器中表達目的多核苷酸的方法

在審

• 申請號: 201880081245.8
• 申請日: 2018-10-22
• 公開（公告）號: CN111867635A
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: 丹妮茲·達爾卡拉;哈南·卡布;若澤-阿蘭·薩赫勒;蒂埃里·萊維拉德;延斯·迪貝爾
• 申請（專利權）人: 法國國家衛生及研究醫學協會;索邦大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;C12N7/00;A61P27/02
• 代理公司: 中原信達知識產權代理有限責任公司 11219
• 代理人: 金海霞;劉慧

1.一種用于治療影響視錐細胞光感受器的視網膜疾病的重組AAV9衍生載體，所述載體包含：

-VP1衣殼蛋白，其中相對于相應的野生型AAV9衣殼蛋白，在所述衣殼蛋白的GH環中插入了7至11個氨基酸長度的肽，其中所述肽包含SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:8中的任一個；和

-在如SEQ ID NO:12所示的pR1.7啟動子或所述啟動子的功能變體控制下的目的多核苷酸。

2.根據權利要求1所述的供使用的重組AAV9衍生載體，其中相對于如SEQ ID NO:10所示的野生型AAV9衣殼蛋白，所述肽被插入GH環中氨基酸588和589之間。

3.根據權利要求1或2所述的供使用的重組AAV9衍生載體，其中所述肽包含SEQ ID NO:9或由SEQ ID NO:9組成。

4.根據權利要求1至3中任一項所述的供使用的重組AAV9衍生載體，所述重組AAV9衍生載體包含如SEQ ID NO:11所示的VP1衣殼蛋白和在如SEQ ID NO:12所示的pR1.7啟動子控制下的目的多核苷酸。

5.根據權利要求1至4中任一項所述的供使用的重組AAV9衍生載體，其中所述對象患有選自下列的視網膜疾病：年齡相關性黃斑變性，Bassen-kornzweig綜合征，無脈絡膜癥，回旋狀萎縮，Refsum綜合征，Usher綜合征，色盲，藍色視錐細胞單色視，全色盲，不完全性全色盲，寡視錐細胞三色視覺，色素性視網膜炎(RP)，黃斑變性，Stargardt病，Bardet-Biedl綜合征，Bornholm眼病，Best病，和Leber先天性黑蒙癥。

6.根據權利要求1至5中任一項所述的供使用的重組AAV9衍生載體，其中所述目的多核苷酸是能用于基因替代療法的基因，優選選自編碼色素性視網膜炎GTP酶調節因子(RPGRORF15)、CNGB3(視錐細胞環核苷酸門控陽離子通道的β亞基)、CNGA3(視錐細胞環核苷酸門控陽離子通道的α亞基)或GNAT2的基因。

7.根據權利要求1至5中任一項所述的供使用的重組AAV9衍生載體，其中所述目的多核苷酸編碼神經營養因子。

8.根據權利要求7所述的供使用的重組AAV9衍生載體，其中所述目的多核苷酸編碼RdCVF、RdCVF2、RdCVFL或RdCVFL2。

9.根據權利要求1至5中任一項所述的供使用的重組AAV9衍生載體，其中所述目的多核苷酸編碼視蛋白，例如視紫紅質、光視蛋白、L/M波長(紅/綠)視錐細胞視蛋白、或短波長(S)視錐細胞視蛋白(藍)。

10.根據權利要求9所述的供使用的重組AAV9衍生載體，其中所述目的多核苷酸編碼由如SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14或SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列組成的視蛋白。

11.根據權利要求1至5中任一項所述的供使用的重組AAV9衍生載體，其中所述目的多核苷酸編碼提供基因功能的位點特異性敲除的位點特異性核酸內切酶，所述核酸內切酶選自鋅指核酸酶(ZFN)、轉錄激活因子樣效應子核酸酶(TALEN)和CRISPR相關核酸內切酶。

12.根據權利要求11所述的供使用的重組AAV9衍生載體，其中所述目的多核苷酸編碼Cas9核酸酶。

13.根據權利要求1至5中任一項所述的供使用的重組AAV9衍生載體，其中所述目的多核苷酸編碼干擾RNA(RNAi)，特別是siRNA或shRNA。

14.根據權利要求1至5中任一項所述的供使用的重組AAV9衍生載體，其中所述目的多核苷酸編碼反義寡核苷酸。