[發明專利]具有改進的精確度的DPO4聚合酶變體

在審

• 申請號: 201880079698.7
• 申請日: 2018-12-10
• 公開（公告）號: CN111655846A
• 公開（公告）日: 2020-09-11
• 發明（設計）人: 馬克·可可里斯;馬克·普林德;格雷戈里·斯科特·蒂森;亞歷山大·艾薩克·萊曼;德魯·古德曼;亞倫·雅各布斯;約翰·查瑟
• 申請（專利權）人: 斯特拉托斯基因公司
• 主分類號: C12N9/12
• 分類號: C12N9/12;C12N15/10;C12Q1/6844;C12Q1/6806;C12Q1/686;C12Q1/6869
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司 11204
• 代理人: 王達佐;洪欣

1.分離的重組DNA聚合酶，所述重組DNA聚合酶包含與SEQ ID NO:1的氨基酸1-340具有至少80％同一性的氨基酸序列，所述重組聚合酶包含在氨基酸位置78處的突變以及選自31、36、62、63、79、243、252、253、254、331、332、334和338的氨基酸位置處的至少一個突變，其中所述氨基酸位置78處的突變是K78D，其中位置的識別為相對于野生型DPO4聚合酶(SEQID NO:1)，并且所述重組DNA聚合酶顯示聚合酶活性。

2.如權利要求1所述的聚合酶，其中所述聚合酶包含與SEQ ID NO:1的氨基酸1-340具有至少85％同一性的氨基酸序列。

3.如權利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置31處的突變是C31S。

4.如權利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置36處的突變是R36K。

5.如權利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置62處的突變是V62K。

6.如權利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置63處的突變是E63R。

7.如權利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置79處的突變選自：E79L、E79D和E79I。

8.如權利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置243處的突變是K243R。

9.如權利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置252處的突變選自：K252D、K252Q和K252R。

10.如權利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置253處的突變是R253Q。

11.如權利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置254處的突變是N254K或N254D。

12.如權利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置331處的突變選自：R331D、R331E、R331N和R331L。

13.如權利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置332處的突變選自：R332K、R332A、R332Q和R332S。

14.如權利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置334處的突變選自：G334N、G334Q、G334F和G334A。

15.如權利要求1或2所述的聚合酶，其中氨基酸位置338處的突變是S338Y或S338F。

16.如權利要求1或2所述的聚合酶，還包含選自以下氨基酸位置處的至少一個突變：42、56、76、82、83、86、152、153、155、156、184、187、188、189、190、248、289、290、291、292、293、294、295、296、297、299、300、301、317、321、324、325和327。