[發(fā)明專利]使用效應(yīng)T細胞(Teff)抗原受體的抗原特異性調(diào)節(jié)性T細胞(Treg)的制作技術(shù)

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201880079385.1
• 申請日: 2018-10-09
• 公開（公告）號: CN111448312A
• 公開（公告）日: 2020-07-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 一戶辰夫;山本卓;佐久間哲史;本庶仁子;川瀨孝和;美山貴彥;鈴木隆二
• 申請（專利權(quán)）人: 國立大學法人廣島大學;組庫創(chuàng)世紀株式會社
• 主分類號: C12N15/09
• 分類號: C12N15/09;A61K35/17;A61K39/00;A61P37/00;A61P37/06;A61P37/08;C12N5/0783;C12Q1/6869
• 代理公司: 北京派特恩知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11270
• 代理人: 李雪;陳萬青

1.一種產(chǎn)生抗原特異性調(diào)節(jié)性T細胞的方法，包括：

針對在效應(yīng)T細胞供體中的抗原特異性效應(yīng)T細胞群中所存在的T細胞受體(TCR)克隆進行鑒定的步驟；以及

將所述克隆中所包含的TCRα基因的全部或部分核酸序列和TCRβ基因的全部或部分核酸序列引入調(diào)節(jié)性T細胞的步驟，該步驟以使得所述TCRα和所述TCRβ成對表達的方式進行引入。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中，鑒定所述TCR克隆的步驟包括測定所述效應(yīng)T細胞群的TCR庫。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中，所述TCR克隆以與所述效應(yīng)T細胞群中的各克隆的存在頻率的平均值相比大1個標準偏差以上的頻率存在。

4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項所述的方法，其中，所述TCR克隆以與所述效應(yīng)T細胞群中的各克隆的存在頻率的平均值相比大2個標準偏差以上的頻率存在。

5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項所述的方法，其中，所述TCR克隆在所述效應(yīng)T細胞群中以大約10％以上的頻率存在。

6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項所述的方法，其中，所述TCRα的基因的全部或部分核酸序列包括與Vα-Jα的CDR3區(qū)相對應(yīng)的序列。

7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項所述的方法，其中，所述TCRβ的基因的全部或部分核酸序列包括與Vβ-D-Jβ的CDR3區(qū)相對應(yīng)的序列。

8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項所述的方法，其中，所述TCRα的基因的全部或部分核酸序列包括Vα-Jα-Cα的cDNA序列。

9.根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項所述的方法，其中，所述TCRβ的基因的全部或部分核酸序列包括Vβ-D-Jβ-Cβ的cDNA序列。

10.根據(jù)權(quán)利要求2至9中任一項所述的方法，其中，所述TCR庫的測定包括：

(1)提供核酸樣品的步驟，所述核酸樣品包含從所述效應(yīng)T細胞群無偏差擴增的T細胞受體(TCR)的核酸序列；

(2)確定所述核酸樣品中包含的所述核酸序列的步驟；以及

(3)基于已確定的所述核酸序列計算各基因的出現(xiàn)頻率或其組合、從而導出所述效應(yīng)T細胞群的TCR庫的步驟。