[發(fā)明專利]具有復制子顆粒和油佐劑的疫苗

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201880078366.7
• 申請日: 2018-12-03
• 公開（公告）號: CN111447948A
• 公開（公告）日: 2020-07-24
• 發(fā)明（設計）人: M·A·莫勒;E·斯特雷特;R·P·A·M·西格斯
• 申請（專利權）人: 英特維特國際股份有限公司
• 主分類號: A61K39/193
• 分類號: A61K39/193;A61K9/10;A61P31/16;A61P31/12;A61K39/00
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 陳文平;劉盈盈

本發(fā)明涉及使用α病毒?復制子RNA顆粒和油佐劑針對動物病原體的接種。涉及疫苗和試劑盒，其包含所述復制子顆粒和所述油佐劑。還涉及制備和使用所述疫苗和所述試劑盒的組分的方法和用途。

技術領域

本發(fā)明涉及使用α病毒-復制子RNA顆粒和油佐劑針對動物病原體的接種。涉及疫苗和試劑盒(kit of parts)，其包含所述復制子顆粒和所述油佐劑。還涉及制備和使用所述疫苗和所述試劑盒的組分的方法和用途。

背景技術

多年來，已在疫苗中使用多種載體策略，以努力針對動物病原體產生保護作用。一種這樣的載體策略包括使用α病毒衍生的復制子RNA顆粒(RP)[Vander Veen等，AnimHealth Res Rev.13(1):1-9(2012)doi:10.1017/S1466252312000011；Kamrud等，J GenVirol.91(Pt 7):1723-1727(2010)]，其是由幾種不同α病毒開發(fā)而成，包括委內瑞拉馬腦炎病毒(VEE)[Pushko等，Virology 239:389-401(1997)]、辛德畢斯(Sindbis)病毒[Bredenbeek等，Journal of Virology 67:6439-6446(1993)]和塞姆利基森林病毒(Semliki Forest virus)[Liljestrom和Garoff,Biotechnology(NY)9:1356-361(1991)]。編碼的病原體抗原在其感染人或動物靶細胞后由復制子顆粒表達。結果是誘導針對表達的抗原的保護性抗體。當與一些傳統(tǒng)疫苗制劑比較時，RP具有有吸引力的安全性和功效性質[Vander Veen等，Anim Health Res Rev.13(1):1-9(2012)]。RP平臺是幾種USDA許可的疫苗的基礎，包括：豬流行性腹瀉疫苗，RNA顆粒(產品代碼19U5.P1)、豬流感疫苗，RNA(產品代碼19A5.D0)、禽流感疫苗，RNA(產品代碼19O5.D0)和處方產品，RNA顆粒(產品代碼9PP0.00)。

α病毒衍生的復制子RNA顆粒缺乏α病毒結構蛋白基因，但是保留了胞質RNA自我擴增必需的復制元件，并且在高活性26Sα病毒亞基因組啟動子的驅動下表達插入的異源核酸。因此，RP是單周期感染性顆粒，由于缺乏結構蛋白基因使得其是復制缺陷的。[Lundstrom,Vaccines 6:2392-2415(2014)]。因此，反而必須在適宜的宿主細胞中提供包裝和生產復制子顆粒所必需的結構蛋白，以產生RP[參見Vajdy等，Immunol.and CellBiol.82:617-627(2004)]。通常通過復制子RNA和編碼結構蛋白的一種或多種“輔助”RNA的瞬時共轉染來提供結構蛋白。或者，可以由包裝細胞系產生RP，包裝細胞系由一個或多個DNA表達盒組成型或瞬時表達病毒結構蛋白。這樣，產生的復制子顆粒保留了載體的復制缺陷性質，因為結構蛋白不包括在所得到的RP基因組中[Polo等，Dev.Biol.,104:181–185(2000)]。當用于免疫目標人類或動物時，這些復制缺陷的α病毒RNA復制子顆粒在體內誘導保護性免疫應答。例如，在全身性免疫小鼠和大動物后，基于VEE的α病毒載體激發(fā)較強的粘膜和全身性免疫應答[Davis等，IUBMB Life 53:209-211(2002)]。

佐劑是能夠對目標人類或動物的免疫系統(tǒng)提供非特異性刺激的已知化合物。佐劑的標準用途是在基于滅活或亞單位抗原的疫苗中。存在多種佐劑類型和組分，例如：鋁鹽(氫氧化鋁或磷酸鋁)、脂質體、葡聚糖、海藻酸鹽(alginate)、細菌組分(如細胞壁組分)、礦物油或非礦物油、合成佐劑(如：非離子嵌段聚合物)、聚胺(如硫酸葡聚糖)、Carbopol^TM、吡喃和皂苷(如：Quil A^TM或Q-vac^TM)?？梢詫⒃碥蘸鸵呙缃M分組合在ISCOM^TM中。

此外，諸如胞壁二肽、二甲基甘氨酸、特夫素(tuftsin)的肽通常作為佐劑。類似地，組合產品如ISA^TM組合物(Seppic,France)。