[發明專利]基于CRISPR效應系統的診斷

在審

• 申請號: 201880078358.2
• 申請日: 2018-10-04
• 公開（公告）號: CN111630162A
• 公開（公告）日: 2020-09-04
• 發明（設計）人: F·張;J·戈滕貝格;O·阿布達耶
• 申請（專利權）人: 博德研究所;麻省理工學院;哈佛學院院長等
• 主分類號: C12N9/22
• 分類號: C12N9/22;C12N9/96;C12N15/09;C12N15/10;C12N15/11
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 陳文平;袁元

1.一種側流裝置，所述側流裝置包括襯底，所述襯底包括第一端，其中所述第一端包括樣品加載部分，以及加載有可檢測配體的第一區域、CRISPR效應系統、檢測構建體、包括第一結合劑的第一捕獲區域和包括第二結合劑的第二捕獲區域，其中所述CRISPR效應系統包含CRISPR效應蛋白和一個或多個向導序列，每一向導序列被配置成結合一種或多種靶分子。

2.如權利要求1所述的側流裝置，其中所述檢測構建體包含RNA或DNA寡核苷酸，所述RNA或DNA寡核苷酸在第一端上包含第一分子并且在第二端上包含第二分子。

3.如權利要求1所述的側流裝置，其中所述樣品加載部分還包括一種或多種擴增試劑用于擴增所述一種或多種靶分子。

4.如權利要求3所述的側流裝置，其中所述試劑用于擴增所述一種或多種靶RNA分子包括基于核酸序列的擴增(NASBA)、重組酶聚合酶擴增(RPA)、環介導等溫擴增(LAMP)、鏈置換擴增(SDA)、解旋酶依賴性擴增(HDA)、切口酶擴增反應(NEAR)、PCR、多重置換擴增(MDA)、滾環擴增(RCA)、連接酶鏈反應(LCR)或分枝擴增法(RAM)。

5.如權利要求2所述的側流裝置，其中所述第一分子是FITC，并且所述第二分子是生物素，反之亦然。

6.如權利要求5所述的側流裝置，其中所述第一捕獲區域與所述樣品加載部分相鄰并且處于所述側流襯底的同一端上。

7.如權利要求5所述的側流裝置，其中所述第一捕獲區域包括特異性地結合所述報告構建體的所述第一分子的第一結合劑。

8.如權利要求7所述的側流裝置，其中所述第一結合劑是固定的或以其他方式固定化至所述第一捕獲區域的抗體。

9.如權利要求1所述的側流裝置，其中所述第二捕獲區域朝向所述側流襯底的與所述第一結合區域相反的一端定位。

10.如權利要求9所述的側流裝置，其中所述第二捕獲區域包括特異性地結合所述報告構建體的所述第二分子或所述可檢測配體的第二結合劑。

11.如權利要求10所述的側流裝置，其中所述第二結合劑是固定的或以其他方式固定化至所述第二捕獲區域的抗體或抗體結合蛋白。

12.如權利要求1所述的側流裝置，其中所述可檢測配體是金納米顆粒。

13.如權利要求12所述的側流裝置，其中所述金納米顆粒被特異性地結合所述檢測構建體的所述第二分子的結合劑修飾。

14.如權利要求13所述的側流裝置，其中所述第一抗體是抗FITC抗體。

15.如權利要求8所述的側流裝置，其中所述抗體是抗FITC抗體。

16.如權利要求8所述的側流裝置，其中所述抗體是抗生物素抗體。

17.如權利要求1所述的側流裝置，其中所述襯底是柔性材料襯底。

18.如權利要求1所述的側流裝置，其中所述柔性材料襯底是紙襯底或基于柔性聚合物的襯底。

19.如權利要求18所述的側流裝置，其中所述CRISPR效應蛋白是靶向RNA的效應蛋白、靶向DNA的蛋白或它們的組合。

20.如權利要求19所述的側流裝置，其中所述靶向RNA的效應蛋白是Cas13。