[發明專利]用于培養哺乳動物細胞的工藝

在審

• 申請號: 201880076383.7
• 申請日: 2018-11-29
• 公開（公告）號: CN111406112A
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發明（設計）人: K·格雷普邁爾;T·林克;邵志新
• 申請（專利權）人: 豪夫邁·羅氏有限公司
• 主分類號: C12P21/02
• 分類號: C12P21/02;C12N5/00
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所 11494
• 代理人: 岑曉東

1.一種用于培養哺乳動物細胞的補料-分批方法,其包含使用pH設定點控制pH,該方法包含

第一培養階段,包含將哺乳動物細胞接種入于第一pH的培養培養基并于第一pH培養細胞,其中在第一培養階段中pH設定點維持于第一pH；和

第二培養階段,包含于比第一pH要高的第二pH培養細胞,其中在第二培養階段中設定點維持于第二pH；

且其中第二pH比第一pH要高至少0.1個pH單位,且其中第二培養階段具有至少6小時的持續時間。

2.依照權利要求1的方法,其中第二培養階段具有至少3天的持續時間。

3.依照權利要求1或權利要求2的方法,其中該方法的溫度維持在±0.5℃內。

4.依照前述權利要求任一項的方法,其中第一pH是范圍6.5-7.5中的值且:

a.第二pH比第一pH要高0.1至0.5個pH單位；或

b.第二pH比第一pH要高0.2個pH單位。

5.依照前述權利要求任一項的方法,其中

a.第一pH是約7.0；且

b.第二pH是約(i)pH 7.1；(ii)pH 7.2；(iii)pH 7.3；(iv)pH 7.4；(v)pH 7.5；或(vi)7.1-7.5。

6.依照前述權利要求任一項的方法,其中設定點或是(a)逐漸或是(b)即刻自第一pH升高至第二pH。

7.依照前述權利要求任一項的方法,其中設定點逐漸自第一pH升高至第二pH,且其中或是(a)設定點連續升高或是(b)設定點以一系列離散步驟升高。

8.依照前述權利要求任一項的方法,其中pH在約24-72小時的時段里逐漸自第一pH升高至第二pH。

9.依照前述權利要求任一項的方法,其包含將pH上移補料培養基添加至培養培養基。

10.依照前述權利要求任一項的方法,其中設定點具有±0.05個pH單位的死區。

11.依照前述權利要求任一項的方法,其中哺乳動物細胞是CHO細胞。

12.依照前述權利要求任一項的方法,其是用于生成產物的方法,其中產物是由哺乳動物細胞表達的,其中任選地哺乳動物細胞是重組細胞,且其中產物是重組蛋白。

13.依照權利要求12的方法,其中產物是(a)抗體；(b)凡努昔珠單抗(vanucizumab)；或(c)依米妥珠單抗(emactuzumab)。

14.依照權利要求12至13任一項的方法,其包含分離產物的步驟,和任選地制備包含產物的組合物的步驟。

15.通過權利要求14的方法生成的產物或組合物。

16.pH上移補料培養基或pH升高劑用于在如前述權利要求任一項中列出的用于培養哺乳動物細胞的方法中

a.提高哺乳動物細胞培養物中的產物滴度,其中產物是在哺乳動物細胞中表達的；

b.提高哺乳動物細胞培養物中的細胞存活力；

c.延長哺乳動物細胞培養物的壽命；

d.降低哺乳動物細胞培養物中的乳酸鹽積累；

e.降低哺乳動物細胞培養物中的銨積累；

f.改善哺乳動物細胞培養物中的pCO₂概況；

g.降低哺乳動物細胞培養物中的滲透摩爾濃度的用途,其中將pH上移補料培養基或pH升高劑添加至哺乳動物細胞培養物以將pH自第一pH提高至第二pH。