[發明專利]增強FX活化的因子X結合物

在審

• 申請號: 201880073999.9
• 申請日: 2018-11-15
• 公開（公告）號: CN111386285A
• 公開（公告）日: 2020-07-07
• 發明（設計）人: J·倫德;K·索恩;M·N·哈恩達爾;M-A·拜塞;E·D·塔弗尼爾;S·斯蒂芬森
• 申請（專利權）人: 諾沃挪第克公司
• 主分類號: C07K16/36
• 分類號: C07K16/36
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 邰紅;郭煜

本申請涉及獨特的FX結合分子，例如可用于治療血友病的抗體及其片段。

發明技術領域

本發明涉及凝血因子X結合物及其在治療凝血病如血友病中的用途。

序列表的援引并入

本申請與電子形式的序列表一起提交。該序列表的全部內容通過引用并入本文。

背景

在凝血病患者中，諸如在患有A型和B型血友病的人中，凝血級聯的各個步驟由于例如凝血因子的缺乏或存在不足而成為功能障礙的。凝血級聯的一部分的這種功能障礙導致不充分的血液凝固以及潛在危及生命的出血，或對內部器官如關節的損傷。

凝血因子VIII(FVIII)缺乏癥，常被稱為A型血友病，是影響全世界約420,000人的先天性出血性病癥，其中約有105,000人目前得到診斷。

A型血友病患者可以接受凝血因子替代療法，如外源性FVIII。常規治療由替代療法組成，其作為出血發作的預防或按需治療而提供。目前針對嚴重A型血友病患者的醫療標準是每周最多三次預防性靜脈內注射血漿來源的FVIII或重組FVIII或其長效變體。

然而，這類患者具有生成針對此類外源因子的中和抗體(所謂的“抑制物”)的風險，從而使得先前有效的療法變得無效。具有“抑制物”(即，針對FVIII的同種抗體)的A型血友病患者是部分先天性、部分獲得性的凝血病的非限制性實例。已生成針對FVIII的“抑制物”的患者無法接受常規替代療法，無論是預防還是按需治療。

此外，外源性凝血因子只可以靜脈內給藥，這對于患者是相當不便和不適的。例如，嬰兒和幼兒可能必須經手術向胸部靜脈內插入靜脈內導管，以確保靜脈通路。這使他們具有很大的發生細菌感染的風險。

在出血的個體中，當血管外TF暴露于血液中活化的FVII(FVIIa)時，由組織因子/因子VIIa(TF/VIIa)復合物引發凝血。TF/VIIa復合物的形成導致因子X(FX)被激活為活化的因子Xa(FXa)，FXa與活化的因子V(FVa)一起生成有限量的凝血酶。

少量的凝血酶激活血小板。活化的血小板支持由活化的因子VIII(FVIIIa)和活化的因子IX(FIXa)組成的tenase復合物的裝配和結合。tenase復合物是FX活化的非常有效的催化劑，而在該第二步中生成的FXa充當FVa/FXa凝血酶原酶復合物中的活性蛋白酶，該復合物負責最終的凝血酶爆發。凝血酶裂解纖維蛋白原以生成血纖蛋白單體，血纖蛋白單體聚合形成血纖蛋白網絡，該網絡密封泄漏的血管并終止出血。快速而廣泛的凝血酶爆發是形成固態且穩定的血纖蛋白凝塊的先決條件。

由凝血因子FVIII活性缺乏引起的FXa形成不足和凝血酶生成減少是A型血友病患者的出血素質的根本原因。

如前所述，FX向其酶活性形式FXa的蛋白水解轉化可以通過包含FIXa及其輔因子FVIIIa的內在FX激活復合物來實現。輔因子結合使FIXa的酶活性增加約五個數量級，并且據信通過Scheiflinger等人(2008)J Thromb Haemost，6：315-322所概述的多種機制發生。值得注意的是，已發現FVIIIa使FIXa的構象得到穩定，FIXa具有增加的對FX的蛋白水解活性(Kolkman JA，Mertens K(2000)Biochemistry，39：7398-7405，T，Brandstetter H(2009)Biol Chem，390：391-400)。基于這一觀察結果并意識到抗體是能夠模擬多種蛋白質-蛋白質相互作用的通用結合蛋白質，Scheiflinger等人對激動性抗FIXa抗體進行了篩選，這些抗體的特征在于在磷脂表面和鈣的存在下，但是在不存在天然輔因子FVIIIa的情況下，增強FIXa對FX的激活的能力。從對5280種雜交瘤上清液的篩選中，發現88種抗體表現出不同程度的FIXa激動活性。