[發明專利]抗CKAP4單克隆抗體

在審

• 申請號: 201880061984.0
• 申請日: 2018-09-26
• 公開（公告）號: CN111133108A
• 公開（公告）日: 2020-05-08
• 發明（設計）人: 菊池章;麓勝己;木村公一
• 申請（專利權）人: 國立大學法人大阪大學
• 主分類號: C12N15/13
• 分類號: C12N15/13;A61K39/395;A61P35/00;A61P37/04;C07K14/71;C07K16/28;C12P21/08
• 代理公司: 北京匯思誠業知識產權代理有限公司 11444
• 代理人: 孫明;王剛

本發明的目的在于提供一種阻礙DKK1與CKAP4的結合而發揮優異的抗腫瘤效果的抗CKAP4單克隆抗體。將序列號1所示的氨基酸序列(CKAP4的氨基酸序列)的451～455位的區域的至少一部分、481～485位的區域的至少一部分、502～510位的區域的至少一部分、503～524位的區域的至少一部分以及585～590位的區域的至少一部分、或者、585～592位的區域的至少一部分作為表位識別的抗CKAP4單克隆抗體有效阻礙DKK1與CKAP4的結合、S2?CP8細胞的AKT的活化、S2?CP8細胞的增殖能力或S2?CP8細胞的轉移能力，而發揮優異的抗腫瘤效果。此外，通過開發使用這些抗CKAP4單克隆抗體的ELISA法，例如，可測定胰腺癌患者的血清CKAP4，因此也有助于伴隨診斷試劑的開發。

技術領域

本發明涉及阻礙DKK1與CKAP4的結合而發揮優異的抗腫瘤效果的抗CKAP4單克隆抗體。另外，本發明涉及利用該抗CKAP4單克隆抗體的抗腫瘤劑。此外，本發明涉及利用該抗CKAP4單克隆抗體的CKAP4的測定方法。

背景技術

報告了分泌蛋白質Dikkopf 1(DKK 1)已知作為Wnt信號抑制因子，其是在胎兒期使形態形成適當化的細胞增殖因子，在出生后，DKK 1抑制大腸癌細胞的增殖。另一方面，DKK 1在多發性骨髓瘤、肝母細胞瘤、腎母細胞瘤、前列腺癌、腎癌(ウィムス腫瘍)、乳腺癌、食道癌、肺癌等中過量表達，推測DKK1具有促進癌細胞的增殖的功能，但其機理尚不明確。

在這樣的狀況下，本發明人等對通過DKK1使細胞的增殖亢進的信號通路進行闡明(非專利文獻1和專利文獻1)。具體而言，由發明人等進行存在于細胞膜的DKK1結合蛋白質的全面解析，其結果確定細胞骨架相關蛋白4(CKAP4)作為DKK1的新型受體。此外，本發明人等闡明以下情況等(非專利文獻1和專利文獻1)：(1)通過DKK1與CKAP4結合，PI3K-AKT通路被活化，促進癌細胞的增殖；(2)DKK1和CKAP4這兩個蛋白質在胰腺癌、肺癌和食道癌中以高頻率在腫瘤部特異性過量表達，這兩個蛋白質高表達的胰腺癌、肺癌和食道癌預后不良；(3)通過DKK1或CKAP4的表達抑制，DKK1和CKAP4這兩個蛋白質高表達的胰腺癌細胞株、肺癌細胞株和食道癌細胞株中抑制AKT的活化，抑制小鼠皮下的腫瘤形成。此外，還報道了通過抗CKAP4多克隆抗體，可阻礙DKK1與CKAP4的結合而抑制小鼠皮下的胰腺癌細胞株、肺癌細胞株和食道癌細胞株的腫瘤形成(非專利文獻1和專利文獻1)。

如此，闡明CKAP4與癌細胞的增殖有關，并且以CKAP4為靶的分子靶向藥物作為新的抗腫瘤劑受到關注。

現有技術文獻

非專利文獻

非專利文獻1：Hirokazu Kimura et al.,J.Clin.Invest.,2016,126(7),p.2689-2705

專利文獻

專利文獻1：國際公開第2016/136372號

發明內容

(發明要解決的課題)

可阻礙DKK1與CKAP4的結合的抗CKAP4單克隆抗體作為以CKAP4為靶的分子靶向藥物是有用的。另外，作為以CKAP4為靶的分子靶向藥物使用的抗CKAP4單克隆抗體中，不僅與CKAP4結合，而且阻礙DKK1與CKAP4的結合，有效抑制癌細胞的增殖是重要的。然而，在現有技術中，為了阻礙DKK1與CKAP4的結合而有效抑制癌細胞的增殖，對于可與CKAP4的哪個區域結合的單克隆抗體是有效的尚不明確。

另外，為了進行以CKAP4為靶的分子靶向藥物的開發、研究，癌癥的發病機理的闡明、診斷等，還需要確立CKAP4的測定方法。

因此，本發明的目的之一在于提供一種阻礙DKK1與CKAP4的結合而發揮優異的抗腫瘤效果的抗CKAP4單克隆抗體。另外，本發明的另一目的在于提供CKAP4的測定方法。