[發明專利]編碼免疫刺激融合分子的多核苷酸及其用途

在審

• 申請號: 201880056938.1
• 申請日: 2018-07-03
• 公開（公告）號: CN111094330A
• 公開（公告）日: 2020-05-01
• 發明（設計）人: T·L·安德烈森;D·S·瓊斯
• 申請（專利權）人: 轉矩醫療股份有限公司
• 主分類號: C07K14/54
• 分類號: C07K14/54;C07K14/55;C07K16/28;C07K19/00;C12N5/078;C12N5/0783;C12N5/09;A61K39/395
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 余穎;陳揚揚

1.一種組合物，其包含：

(a)一種或多種包含mRNA的工程改造的多核苷酸，其中所述一種或多種工程改造的多核苷酸編碼融合蛋白，所述融合蛋白包含通過肽接頭可操作地連接至免疫細胞靶向部分的細胞因子或生長因子分子或其變體，所述免疫細胞靶向部分包含針對靶免疫細胞上細胞表面抗原的完全或部分結合位點，和

(b)靶免疫細胞。

2.如權利要求1所述的組合物，其中所述一種或多種工程改造的多核苷酸中的至少一種還包含編碼信號肽的序列。

3.如權利要求1所述的組合物，其中所述mRNA是修飾的mRNA。

4.如權利要求1所述的工程改造的多核苷酸分子，其中所述一種或多種工程改造的多核苷酸包含非整合RNA。

5.一種在免疫細胞中誘導瞬時基因表達的方法，其包括在適合將所述多核苷酸引入所述免疫細胞的條件下，使靶免疫細胞與有效量的第一組合物接觸，所述第一組合物包含一種或多種包含mRNA的工程改造的多核苷酸，其中所述一種或多種工程改造的多核苷酸編碼融合蛋白，所述融合蛋白包含通過肽接頭與免疫細胞靶向部分可操作地連接的細胞因子或生長因子分子或其變體，所述免疫細胞靶向部分包含針對所述靶免疫細胞上細胞表面抗原的完全或部分結合位點。

6.如權利要求5所述的方法，其中所述免疫細胞具有在其表面表達或以其他方式展示的細胞表面抗原。

7.如權利要求5所述的方法，其中所述一種或多種工程改造的多核苷酸通過脂轉染，通過電穿孔，通過核穿孔，通過流體動力休克或以納米顆粒方式引入所述免疫細胞。

8.一種在免疫細胞中表達細胞因子或生長因子分子或其變體的方法，其包括在適合將工程改造的多核苷酸引入所述免疫細胞的條件下，使所述靶免疫細胞與一種或多種包含mRNA的工程改造的多核苷酸接觸，其中所述一種或多種工程改造的多核苷酸編碼融合蛋白，所述融合蛋白包含通過肽接頭可操作地連接至免疫細胞靶向部分的細胞因子或生長因子分子或其變體，所述免疫細胞靶向部分包含針對所述靶免疫細胞上細胞表面抗原的完全或部分結合位點。

9.如權利要求5或8所述的方法，其中所述接觸體內或離體發生。

10.如權利要求5所述的方法，還包括在適合于將第二組合物的一種或多種工程改造的多核苷酸引入所述免疫細胞的條件下，使所述免疫細胞與有效量的包含一種或多種工程改造的多核苷酸的第二組合物接觸。

11.如權利要求10所述的方法，其中所述第二組合物包含一起編碼細胞因子分子，生長因子分子，共刺激分子和前述任一種的變體中的一種或多種的一種或多種工程改造的多核苷酸。

12.如權利要求10所述的方法，其中將第一組合物的一種或多種工程改造的多核苷酸和所述第二組合物的一種或多種工程改造的多核苷酸共轉染到免疫細胞中。

13.一種修飾的免疫細胞，其包含：

具有其中轉染有一種或多種工程改造的多核苷酸的免疫細胞，

其中所述一種或多種工程改造的多核苷酸包含mRNA，其中所述一種或多種工程改造的多核苷酸編碼細胞因子或生長因子分子或其變體，和

其中任選地，所述細胞因子或生長因子分子以與免疫細胞靶向部分可操作地連接的融合分子提供，所述免疫細胞靶向部分具有針對由免疫細胞表達或以其他方式在其上展示的細胞表面抗原的完全或部分結合位點。

14.如權利要求13所述的修飾的免疫細胞，其中所述免疫細胞是健康和/或非惡性免疫細胞、淋巴細胞或T細胞。