[發(fā)明專利]細(xì)胞擴(kuò)增

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201880055013.5
• 申請(qǐng)日: 2018-08-24
• 公開（公告）號(hào): CN111065728A
• 公開（公告）日: 2020-04-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 布萊恩·J·南柯維斯;馬克·E·瓊斯;多米辛達(dá)·M·希爾
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 泰爾茂比司特公司
• 主分類號(hào): C12M1/12
• 分類號(hào): C12M1/12;C12M3/04;C12M1/00
• 代理公司: 北京派特恩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11270
• 代理人: 王子曄;陳萬青

1.一種在細(xì)胞擴(kuò)增系統(tǒng)中擴(kuò)增細(xì)胞的方法，所述方法包括：

將含多個(gè)細(xì)胞的第一體積的流體裝載到所述細(xì)胞擴(kuò)增系統(tǒng)的第一流體流動(dòng)路徑，其中，生物反應(yīng)器與所述第一流體流動(dòng)路徑流體相關(guān)；

將含培養(yǎng)基的第二體積的流體裝載到所述第一流體流動(dòng)路徑的一部分以將所述第一體積的流體置于所述生物反應(yīng)器的第一部分中；

將所述多個(gè)細(xì)胞暴露于活化劑；

在第一時(shí)間段內(nèi)根據(jù)第一過程供養(yǎng)所述細(xì)胞；

在所述第一時(shí)間段內(nèi)擴(kuò)增所述多個(gè)細(xì)胞；

在所述第一時(shí)間段擴(kuò)增所述多個(gè)細(xì)胞之后，在第二時(shí)間段內(nèi)以第一循環(huán)速率循環(huán)所述多個(gè)細(xì)胞以減少第一細(xì)胞簇中的細(xì)胞數(shù)量；

根據(jù)第二過程供養(yǎng)所述細(xì)胞；

在第三時(shí)間段內(nèi)擴(kuò)增所述多個(gè)細(xì)胞，其中，所述第三時(shí)間段少于二十四小時(shí)；

在所述第三時(shí)間段擴(kuò)增所述多個(gè)細(xì)胞之后，在第四時(shí)間段內(nèi)以第二循環(huán)速率循環(huán)所述多個(gè)細(xì)胞以減少第二細(xì)胞簇中的細(xì)胞數(shù)量；以及

收獲經(jīng)擴(kuò)增的細(xì)胞。

2.權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述第一過程包括：

將含培養(yǎng)基的第三體積的流體以第一流速泵入所述生物反應(yīng)器的第一端口；以及

將含培養(yǎng)基的第四體積的流體以第二流速泵入所述反應(yīng)器的第二端口，其中，所述進(jìn)入所述生物反應(yīng)器的所述第二流速的流體的方向與進(jìn)入所述生物反應(yīng)器的所述第一流速的流體的方向相反。

3.權(quán)利要求2所述的方法，其中，所述第二過程包括：

將含培養(yǎng)基的第五體積的流體以第三流速泵入所述生物反應(yīng)器的第一端口；以及

將含培養(yǎng)基的第六體積的流體以第四流速泵入所述生物反應(yīng)器的第二端口，其中，進(jìn)入所述生物反應(yīng)器的所述第四流速的的流體的方向與進(jìn)入所述生物反應(yīng)器的所述第三流速的流體的方向相反。

4.權(quán)利要求3所述的方法，其中，所述多個(gè)細(xì)胞包括T細(xì)胞。

5.權(quán)利要求4所述的方法，其中，所述活化劑位于珠子上。

6.權(quán)利要求5所述的方法，其中，所述多個(gè)細(xì)胞包括外周血單核細(xì)胞(PBMC)。

7.權(quán)利要求6所述的方法，其中，所述多個(gè)細(xì)胞包括約1×10⁶至約500×10⁶個(gè)PBMC。

8.權(quán)利要求7所述的方法，其中，所述第一體積的流體包括人血清。

9.權(quán)利要求8所述的方法，其中，所述經(jīng)擴(kuò)增細(xì)胞包括約1×10⁹至約100×10⁹個(gè)細(xì)胞。

10.權(quán)利要求9所述的方法，其中，在所述方法期間，乳酸水平維持在或低于約15mmol/L。