[發明專利]多路復用的受體-配體相互作用篩選

在審

• 申請號: 201880051978.7
• 申請日: 2018-07-05
• 公開（公告）號: CN111133100A
• 公開（公告）日: 2020-05-08
• 發明（設計）人: 斯里拉姆·科蘇里;埃里克·瓊斯
• 申請（專利權）人: 加利福尼亞大學董事會
• 主分類號: C12N5/0793
• 分類號: C12N5/0793;C12N15/63;C12N15/79;C40B40/06;C40B40/08
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 鄭斌;劉振佳

1.一種核酸，其包含：

i)異源受體基因；

ii)包含受體應答元件的誘導型報告物；其中所述報告物的表達依賴于由所述受體基因編碼的受體的活性的激活，并且其中所述報告物包含條形碼，所述條形碼包含對于所述異源受體基因獨特的索引區。

2.一種包含權利要求1的核酸的載體。

3.一種包含異源受體基因的載體。

4.權利要求3的載體，其中所述載體還包含誘導型報告物；其中所述報告物的表達依賴于由所述受體基因編碼的受體的活性的激活，并且其中所述報告物包含條形碼，所述條形碼包含對于所述異源受體基因獨特的索引區。

5.一種包含誘導型報告物的載體，其中所述報告物包含條形碼。

6.權利要求2-4中任一項的載體，其中所述受體基因編碼G蛋白偶聯受體(GPCR)。

7.權利要求2-6中任一項的載體，其中所述受體基因還包含一種或多種另外的編碼輔助多肽的多核苷酸。

8.權利要求7的載體，其中所述輔助多肽包含可選擇或可篩選蛋白。

9.權利要求7或8的載體，其中所述輔助多肽包含蛋白質標簽。

10.權利要求7-8中任一項的載體，其中所述輔助多肽包含轉錄因子。

11.權利要求10的載體，其中所述受體基因編碼包含所述受體基因和所述輔助多肽的融合蛋白。

12.權利要求11的載體，其中所述融合蛋白在所述受體基因和所述輔助多肽之間包含蛋白酶位點。

13.權利要求2-12中任一項的載體，其中所述輔助多肽包含一個或多個運輸標簽。

14.權利要求13的載體，其中所述輔助多肽包含兩個運輸標簽。

15.權利要求13或14的載體，其中所述運輸標簽包含Lucy和/或Rho標簽。

16.權利要求2-15中任一項的載體，其中所述報告物由GPCR激活時的信號轉導誘導。

17.權利要求2-16中任一項的載體，其中所述受體應答元件包含以下中的一種或多種：cAMP應答元件(CRE)、活化T細胞核因子應答元件(NFAT-RE)、血清應答元件(SRE)和血清響應因子應答元件(SRF-RE)。

18.權利要求17的載體，其中所述受體應答元件包含CRE。

19.權利要求18的載體，其中所述CRE包含SEQ ID NO：1的至少5個重復。

20.權利要求10-19中任一項的載體，其中所述受體應答元件包含由所述輔助多肽轉錄因子結合的DNA元件。

21.權利要求20的載體，其中所述輔助多肽轉錄因子包含反向四環素控制的轉錄激活物(rtTA)，并且所述受體應答元件包含四環素應答元件(TRE)。

22.權利要求6-21中任一項的載體，其中所述GPCR是嗅覺受體(OR)。

23.權利要求2-22中任一項的載體，其中所述受體包含腎上腺素受體。