[發明專利]用于免疫活性蛋白(IAP)生產的名為I-SPGA的復合免疫原的組分、制備方法和評估

在審

• 申請號: 201880050871.0
• 申請日: 2018-06-05
• 公開（公告）號: CN111263639A
• 公開（公告）日: 2020-06-09
• 發明（設計）人: I·V·帕特拉斯庫
• 申請（專利權）人: R·S·凡塔納
• 主分類號: A61K39/00
• 分類號: A61K39/00;A61K39/02;A61K39/12;C07K16/02;C07K16/08;C07K16/12;C07K16/14
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 黃琳娟

本發明涉及命名為I?spga的免疫原的組分和制備方法，該免疫原由復合抗原組成，該復合抗原由從患者處分離的18至26種病原微生物制成，用二元乙烯亞胺(BEI)和福爾馬林滅活，稀釋在SPGA免疫增強劑中，與佐劑QS?21混合。通過給母雞接種I?spga免疫原，獲得了高免疫蛋(Imunospaga)，其含有對18?26種抗原具有特異性的免疫活性蛋白，用于免疫。通過SPGA免疫增強劑放大抗原信號，母雞的免疫應答對所用的抗原具有特異性，并由于特別的免疫程序，使免疫系統復雜而強烈地發揮作用：I?spga復合抗原含有從患者處分離的18?26種微生物，細菌體、通過超聲獲得的細菌體成分、纖毛、外毒素、內毒素、孢子、病毒、真菌或酵母菌。這種病理材料通過BEI和福爾馬林滅活。I?spga抗原有三種類型。標準I?spga抗原由從羅馬尼亞患者中分離出的18至24種對抗生素有抗性的細菌組成。特異性I?spga復合抗原由含有7?9株菌株的混合物的I?spga復合抗原組成，該菌株的混合物來源于從羅馬尼亞患者處分離的單一物種的細菌、真菌或酵母菌，并與SPGA和QS?21混合，用于接種先前用標準I?spga抗原免疫的母雞。個性化I?spga抗原由含細胞碎片和源于患者處的病理材料組成，經BEI和福爾馬林滅活，并與SPGA和QS?21混合，用于免疫先前用標準I?spga抗原免疫的母雞。現在這項專利技術包含了新一代的生物制品，其中母雞在不同時間間隔，對不同組經腸胃外接種的抗原的免疫反應是重疊的。雞應答是均勻的，額外的免疫原給藥和作為免疫增強劑的SPGA放大了抗原信號和免疫應答。I?spga免疫原以及免疫應答包括兩個標記物，G和A，識別用于免疫的I?spga抗原，以對抗用于生產Imunoinstant組的生物制劑或類似產品的抗原。I?spga免疫原用于免疫母雞來獲得免疫活性蛋白，可用于治療免疫缺陷、牛皮癬、大皰性表皮松解癥、其他皮膚病、醫院感染、在兒童和成人泌尿系統中對抗生素有抗性的感染。

技術領域

人類醫學、獸醫學、免疫病理學、多克隆抗體、通過被動免疫的預防和治愈性治療、抗生素抗性的控制。

發明描述

包括參考書目的當前技術的介紹

在2012-2014年期間，開展了有關高免疫蛋的生產和母雞的免疫球蛋白(IgY)的使用的研究。這些研究產生了一些專利(16-20)。上述所提及的產品是第一代免疫球蛋白和免疫調節劑，并且是通過涉及到用于母雞免疫的免疫原不同的技術獲得的。Imunoinstant品牌包括從傳統的蛋雞中制備的生物制品，其中多價抗原由細菌、酵母菌、病毒制備而成，用于在37℃下，用3％福爾馬林進行2小時的標準方法的滅活。該方法不允許在細菌、酵母菌、病毒或真菌抗原結構中保留某些抗原組分和表位。在所有的細菌種類中，使用相同的方法，用福爾馬林滅活并用QS-21佐劑形成免疫原。對于有些細菌菌株，超聲波處理可以增加抗原的接觸表面。在這一代生物制品中，從患者處分離獲得的幾種具有抗生素抗性或敏感的菌株的抗原的混合物代表用于免疫的抗原物質，其在滅活后，作為抗原與純化的皂甙衍生物QS-21混合被制備出來。

免疫的成功取決于幾個因素，包括第一次、第二次和隨后的免疫之間的時間間隔。為了這一目的，進行了大量研究，采用0、14和28天間隔(37、26)，或采用連續7周(27)每周一次。幾位作者以10天間隔對雞進行免疫(27、28)，但一般建議是，第一次和第二次免疫原的注射之間的間隔至少應為4周。這反映了免疫的記憶，必須給其時間來形成(31)。

在0天、10周和15周免疫的母雞中，獲得了高滴度的抗體，范圍為1:160,000(30)。這些結果是可重復的，是相似的，并且建議施加一稍后的脈沖(31、55)。已經證實，通過將脈沖間隔從14天延長到42天可以獲得非常高的滴度(32)。有證據表明，在短時間內進行頻繁的免疫接種會導致免疫的抑制，而不是刺激抗體的產生(29)。

對于第一代產品Imunoinstant的制備，母雞分別以10天的短間隔進行免疫。相反，新一代生物制品，其作為本專利主題，分別在0、30和45天進行免疫，留下時間來恢復母雞的免疫記憶。

免疫對產蛋能力的影響