[發明專利]用于分選液滴和珠的方法和系統

有效

• 申請號: 201880048002.4
• 申請日: 2018-05-17
• 公開（公告）號: CN110945139B
• 公開（公告）日: 2023-09-05
• 發明（設計）人: 拉吉夫·巴拉德瓦杰;邁克爾·史諾-萊文;安東尼·馬卡若維茨;史蒂文·肖特
• 申請（專利權）人: 10X基因組學有限公司
• 主分類號: C12Q1/6806
• 分類號: C12Q1/6806;C12N15/10;G01N21/64;G01N15/14;C12M1/00;B01L3/00
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 王瑋瑋;鄭霞

1.一種用于分選液滴的方法，包括：

(a)使第一相與第二相接觸以生成多個液滴，其中所述第一相和所述第二相是不混溶的，其中所述多個液滴包含場可吸引的顆粒，并且其中所述多個液滴包含(i)第一子集的液滴，所述第一子集的液滴各自包括但不多于一個生物顆粒，和(ii)第二子集的液滴，所述第二子集的液滴各自包括多于一個生物顆粒，其中所述生物顆粒是細胞、細胞的衍生物或細胞的成分；

(b)將所述多個液滴沿著第一通道引導至所述第一通道與第二通道和第三通道的交叉點；以及

(c)在足以將所述第一子集的所述多個液滴中的所有或一部分與所述第二子集的所述多個液滴中的所有或一部分分離的條件下，使包含所述場可吸引的顆粒的所述多個液滴經受電場或磁場，其中在分離后，所述第一子集的所述多個液滴中的所有或所述部分沿著所述第二通道流動，并且所述第二子集的所述多個液滴中的所有或所述部分沿著所述第三通道流動。

2.如權利要求1所述的方法，其中所述第一子集的所述多個液滴包括具有與其偶聯的分子條形碼的顆粒。

3.如權利要求2所述的方法，其中所述具有與其偶聯的分子條形碼的顆粒是珠。

4.如權利要求3所述的方法，其中所述珠是凝膠珠。

5.如權利要求1所述的方法，其中所述第一子集的所述多個液滴中的每個液滴包含比包括多于一個生物顆粒的所述第二子集的所述多個液滴中的每個液滴多的場可吸引的顆粒。

6.如權利要求5所述的方法，其中在所述第一子集上感應的力大于在包括多于一個生物顆粒的所述第二子集的液滴上感應的力。

7.如權利要求1所述的方法，其中所述場可吸引的顆粒是磁場可吸引的顆粒或電場可吸引的顆粒。

8.如權利要求7所述的方法，其中所述場可吸引的顆粒是順磁性顆粒或導電顆粒。

9.如權利要求1所述的方法，還包括在(c)之后，使來源于所述第一子集中的所述生物顆粒的核酸分子經受核酸測序。

10.如權利要求9所述的方法，還包括在(c)之后，使所述第一子集的所述多個液滴經受核酸擴增條件，以產生來自所述第一子集中的所述生物顆粒的所述核酸分子的擴增產物。

11.如權利要求10所述的方法，還包括使所述擴增產物經受核酸測序。

12.如權利要求1所述的方法，其中足以將所述第一子集的所述多個液滴中的所有或所述部分和所述第二子集的所述多個液滴中的所有或所述部分分離的所述電場或磁場的所述條件至少部分地基于所述多個液滴的尺寸和所述第一子集的所述多個液滴中的所述生物顆粒的尺寸之間的比率來確定。

13.如權利要求1所述的方法，其中所述多個液滴使用壓力脈沖沿著所述第一通道被引導。

14.如權利要求1所述的方法，還包括使所述第一子集的所述多個液滴中的單獨的液滴經受刺激，以促進所述生物顆粒中的聚合。

15.如權利要求14所述的方法，其中所述刺激在所述交叉點之前被施加。

16.如權利要求14所述的方法，還包括(i)檢測所述單獨的液滴，以及(ii)在檢測所述單獨的液滴后，使所述單獨的液滴經受所述刺激。

17.如權利要求1所述的方法，其中所述生物顆粒是封閉在聚合物基體內或構成聚合物基體的細胞。

18.如權利要求1所述的方法，其中所述生物顆粒是封閉在凝膠內或構成凝膠的細胞。