[發(fā)明專利]用于熒光和比色蛋白質(zhì)定量的方法和組合物

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201880047653.1
• 申請日: 2018-07-16
• 公開（公告）號: CN110892268A
• 公開（公告）日: 2020-03-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: C·艾蒂安;R·加納帕斯;E·哈波拉德;K·菲瑟-何尼甘;A·麥克布萊德;B·韋伯;A·普拉薩那
• 申請（專利權(quán)）人: 皮爾斯生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所 11038
• 代理人: 李程達(dá)

1.一種用于測定樣品中蛋白質(zhì)或肽濃度的方法，其包括：

(a)通過將所述樣品與以下合并來形成混合物：

(i)銅；

(ii)乙腈；和

(iii)包括下述通式(I)的試劑：

其中，

R₁、R₂、R₃、R₄、R₅和R₆各自獨(dú)立地為烷基，包含但不限于C₁-C₆直鏈或支鏈烷基或C₆-C₂₀芳基、烷基芳基或芳基烷基，例如甲基(-CH₃)、乙基(-CH₂CH₃)、丙基(-CH₂CH₂CH₃)、丁基(-CH₂CH₂CH₂CH₃)或苯基(-C₆H₅)；

R₃、R₄、R₅和R₆各自還另外獨(dú)立地選自由以下組成的群組：氫(H)、鈉(Na⁺)的磺酸(-SO₃^-)鹽、鉀(K⁺)的磺酸(-SO₃^-)鹽、鋰(Li⁺)的磺酸(-SO₃^-)鹽、鈉(Na⁺)的膦酸(-PO₃^-)鹽、鉀(K⁺)的膦酸(-PO₃^-)鹽、鋰(Li⁺)的膦酸(-PO₃^-)鹽、鈉(Na⁺)的羧酸(-CO₂^-)鹽、鉀(K⁺)的羧酸(-CO₂^-)鹽和鋰(Li⁺)的羧酸(-CO₂^-)鹽；

其中當(dāng)R₅和R₆是苯基(-C₆H₅)時，所述苯基(-C₆H₅)可以另外獨(dú)立地具有附接到其的分子，所述分子選自由以下組成的群組：鈉(Na⁺)的磺酸(-SO₃^-)鹽、鉀(K⁺)的磺酸(-SO₃^-)鹽、鋰(Li⁺)的磺酸(-SO₃^-)鹽；鈉(Na⁺)的膦酸(-PO₃^-)鹽、鉀(K⁺)的膦酸(-PO₃^-)鹽、鋰(Li⁺)的膦酸(-PO₃^-)鹽、鈉(Na⁺)的羧酸(-CO₂^-)鹽、鉀(K⁺)的羧酸(-CO₂^-)鹽和鋰(Li⁺)的羧酸(-CO₂^-)鹽；并且

其中所述試劑以水合((I)H₂O)或非水合形式存在；

(b)在足以形成有色絡(luò)合物的條件下溫育所述混合物；和

(c)在第一波長下測量由所述有色絡(luò)合物激發(fā)的熒光變化，并且在第二波長下測量發(fā)射，其中所測量的熒光為所述樣品中蛋白質(zhì)或肽濃度的指示，或者通過在450到500nm下測量所述有色絡(luò)合物的吸光度作為所述樣品中蛋白質(zhì)或肽濃度的直接指示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述第一波長在450nm到約480nm之間。