[發明專利]皂苷的新用途及其分離方法

在審

• 申請號: 201880046298.6
• 申請日: 2018-07-10
• 公開（公告）號: CN110914285A
• 公開（公告）日: 2020-03-24
• 發明（設計）人: 亞歷山大·翁;馬蒂亞斯·F·梅爾齊;辛科·薩瑪
• 申請（專利權）人: 柏林自由大學
• 主分類號: C07H15/24
• 分類號: C07H15/24;C12N15/87;A61K31/704;C07H15/256
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司 11204
• 代理人: 王達佐;洪欣

1.式(I)的皂苷在向細胞體外遞送核酸、脂質、肽和/或蛋白質中的用途：

其中

R¹是木糖殘基或阿拉伯糖殘基，其C1原子與式(I)中相應的木糖殘基結合；和

R²是獨立于其他R²殘基的相同分子H或乙酰基殘基，條件是皂苷中存在至少兩個乙酰基殘基。

2.如權利要求1所述的用途，其特征在于，所述細胞是真核細胞。

3.式(I)的皂苷，其通過向人或動物體內遞送核酸、脂質、肽和/或蛋白質而用于治療或診斷中：

其中

R¹是木糖殘基或阿拉伯糖殘基，其C1原子與式(I)中相應的木糖殘基結合；和

R²是獨立于其他R²殘基的相同分子H或乙酰基殘基，條件是皂苷中存在至少兩個乙酰基殘基。

4.如權利要求1或2所述的用途或權利要求3所述用途的皂苷，其特征在于，R¹是木糖殘基和/或所述皂苷僅帶有兩個乙酰基。

5.如權利要求4所述的用途或權利要求4所述用途的皂苷，其特征在于，所述乙酰基與相應異鼠李糖殘基的C3和C4位上的氧原子結合。

6.如權利要求1、2、4或5中任一項所述的用途、或權利要求3至5中任一項所述用途的皂苷，其特征在于，所述皂苷與選自以下的至少一種轉染試劑組合應用：基于脂質體的轉染試劑和基于聚合物的轉染試劑。

7.轉染組合物，其包含選自以下的至少一種轉染試劑和式(I)的皂苷：基于脂質體的轉染試劑和基于聚合物的轉染試劑：

其中

R¹是木糖殘基或阿拉伯糖殘基，其C1原子與式(I)中相應的木糖殘基結合；和

R²是獨立于其他R²殘基的相同分子H或乙酰基殘基，條件是皂苷中存在至少兩個乙酰基殘基。

8.如權利要求7所述的轉染組合物，其特征在于，R¹是木糖殘基和/或皂苷僅帶有兩個乙酰基。

9.如權利要求8所述的轉染組合物，其特征在于，所述乙酰基與相應異鼠李糖殘基的C3和C4位上的氧原子結合。

10.體外轉染的方法，其包括在存在式(I)的皂苷的情況下將細胞與核酸一起孵育的步驟：

其中

R¹是木糖殘基或阿拉伯糖殘基，其C1原子與式(I)中相應的木糖殘基結合；和

R²是獨立于其他R²殘基的相同分子H或乙酰基殘基，條件是皂苷中存在至少兩個乙酰基殘基。

11.如權利要求10所述的方法，其特征在于，所述細胞是真核細胞。

12.如權利要求10或11所述的方法，其特征在于，所述核酸形成納米顆粒的一部分。

13.如權利要求10至12中任一項所述的方法，其特征在于，在1μg/mL至25μg/mL的濃度范圍使用所述皂苷。

14.如權利要求10至13中任一項所述的方法，其特征在于，所述皂苷與選自以下的至少一種轉染試劑組合使用：基于脂質體的轉染試劑和基于聚合物的轉染試劑。

15.從縷絲花(Gypsophila elegans M.Bieb)分離式(I)的皂苷的方法，其包括以下步驟：

其中

R¹是木糖殘基或阿拉伯糖殘基，其C1原子與式(I)中相應的木糖殘基結合；和

R²是獨立于其他R²殘基的相同分子H或乙酰基殘基，條件是皂苷中存在至少兩個乙酰基殘基；

·切割縷絲花的根，

·冷凍干燥并研磨切好的根，以獲得根粉，

·用高濃度有機溶劑提取所述根粉，以獲得根提取物，

·從所述根提取物中去除高濃度有機溶劑，以獲得干提取物，

·使所述干提取物溶解在低濃度有機溶劑中，以獲得提取液，

·使所述提取液進行至少一個層析分離步驟，以獲得純化的皂苷溶液，以及

·從所述純化的皂苷溶液中去除任何溶劑，以獲得純化的皂苷粉。