[發(fā)明專利]具有改善的鐵硫簇遞送的細胞工廠

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201880045992.6
• 申請日: 2018-07-12
• 公開（公告）號: CN110869384A
• 公開（公告）日: 2020-03-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: H·J·吉尼;A·P·巴利;N·邁岺-彼得森
• 申請（專利權(quán)）人: 毒菌公司
• 主分類號: C07K14/245
• 分類號: C07K14/245;C12P17/18;C12N9/10;C12N9/88;C12P7/40;C12P17/16;C12N1/21
• 代理公司: 北京三友知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11127
• 代理人: 李棟修;龐東成

1.一種用于增強生物素或硫辛酸或硫胺素的生產(chǎn)的經(jīng)遺傳修飾的細菌；其中，所述細菌包含：

a.編碼突變IscR多肽的經(jīng)遺傳修飾的內(nèi)源iscR基因，其中所述突變IscR多肽的氨基酸序列與選自由SEQ ID No:2、4、6、8、10、12和14組成的組的序列具有至少80％的氨基酸序列同一性，并且其中，所述氨基酸序列具有選自由以下組成的組的至少一種氨基酸置換：

i.L15X、C92X、C98X、C104X和H107X；其中X是除SEQ ID No:2、4、6、8、10、12和14中的對應(yīng)氨基酸殘基以外的任何氨基酸，

和

b.編碼選自由以下組成的組的多肽的至少一種轉(zhuǎn)基因：

ii.具有生物素合酶活性(EC 2.8.1.6)的多肽，

iii.具有硫辛酸合酶活性(EC 2.8.1.8)的多肽，

iv.具有HMP-P合酶活性(EC 4.1.99.17)的多肽，和

v.具有酪氨酸裂解酶活性(EC 4.1.99.19)的多肽。

2.如權(quán)利要求1所述的用于增強生物素或硫辛酸或硫胺素的生產(chǎn)的經(jīng)遺傳修飾的細菌，其中，所述突變IscR多肽中的所述至少一種氨基酸置換選自由以下組成的組：

a.L15X，其中X是F、Y、M和W中的任一個；

b.C92X，其中X是Y、A、M、F和W中的任一個；

c.C98X，其中X是A、V、I、L、F和W中的任一個；

d.C104X，其中X是A、V、I、L、F和W中的任一個；和

e.H107X，其中X是A、Y、V、I和L中的任一個。

3.如權(quán)利要求1或2所述的經(jīng)遺傳修飾的細菌，其中，所述至少一種轉(zhuǎn)基因編碼具有生物素合酶活性(EC 2.8.1.6)的多肽，所述細菌還包含編碼一種或多種選自由以下組成的組的多肽的其他轉(zhuǎn)基因：

a.具有SAM(S-腺苷甲硫氨酸)依賴性甲基轉(zhuǎn)移酶活性(EC 2.1.1.197)的多肽；

b.具有7-酮-8-氨基壬酸(KAPA)合酶活性(EC 2.3.1.47)的多肽；

c.具有7,8-二氨基壬酸(DAPA)合酶活性(EC:2.6.1.62或EC:2.6.1.105)的多肽；和

d.具有脫硫生物素(DTB)合酶活性(EC 6.3.3.3)的多肽，

e.具有庚二酰基-[酰基-載體蛋白]甲基酯酯酶活性(EC 3.1.1.85)的多肽，和

f.具有6-羧基己酸-CoA連接酶活性(EC 6.2.1.14)的多肽；

其中，所述細菌用于增強生物素的生產(chǎn)。

4.如權(quán)利要求1或2所述的經(jīng)遺傳修飾的細菌，其中，所述至少一種轉(zhuǎn)基因編碼具有硫辛酸合酶活性(EC 2.8.1.8)的多肽，所述細菌還包含編碼一種或多種選自由以下組成的組的多肽的其他轉(zhuǎn)基因：

a.具有辛酰基轉(zhuǎn)移酶活性(EC 2.3.1.181)的多肽，

b.包含丙酮酸脫氫酶(EC 2.3.1.12)的二氫硫辛酰基賴氨酸殘基乙酰轉(zhuǎn)移酶組分的多肽，和

c.具有硫辛酸-蛋白連接酶A活性(EC:6.3.1.20)的多肽。

其中，所述細菌用于增強硫辛酸的生產(chǎn)。