[發明專利]電壓門控鈣通道缺陷亞基α2δ及其應用

在審

• 申請號: 201880034747.5
• 申請日: 2018-05-19
• 公開（公告）號: CN110945014A
• 公開（公告）日: 2020-03-31
• 發明（設計）人: 弗朗茨·克日切克;喬治·斯科特里斯
• 申請（專利權）人: 諾瓦色生物公司
• 主分類號: C07K14/435
• 分類號: C07K14/435
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 顧晉偉;尹玉峰

所述電壓選通的鈣通道輔助亞基α2δ?1是已知發揮治療作用的加巴噴丁類化合物的靶標/受體，例如癲癇和神經性疼痛。已知加巴噴丁類通過結合精氨酸發揮其作用(R)在位于α2δ?1的N端的RRR基序內。本發明描述了一種新的加巴噴丁類結合位點，其位于vgcc_a2結構域內和α2δ?1的IKAK氨基酸序列內。這種新鑒定的氨基酸結合位點可用于在神經性疼痛中和在其中參與α2δ?1的其它病癥和病癥中具有治療性的新化合物的鑒定和表征中的用途。

技術領域

本發明涉及本發明涉及電壓門控鈣通道(VGCCs)，特別是但不限于，位于電壓選通鈣通道的α2δ-1亞基內的新肽，其形成結合位點，例如用于加巴噴丁類。本發明還涉及包含所述分離的肽的測試系統，以及鑒定與所述肽結合的試劑的方法本發明還包括制備所述肽的方法，使用所述肽鑒定的試劑，能夠與所述分離的肽結合的抗體，表達所述肽的突變版本的動物及其用途

本發明的背景技術

電壓選通的鈣(□)通道是用于可興奮細胞中的許多關鍵功能的必需成分，包括神經遞質釋放和肌肉收縮。發現α1亞基與鈣通道阻斷劑結合，鑒定為成孔通道亞基。β和α2δ亞單元然后被稱為輔助子單元或輔助子單元[1]

已經鑒定了四個α2δ亞基基因。cacna 2 d 1編碼α2δ-1，首先在骨骼肌中識別該α2δ-1。本發明公開了一種治療心腦血管疾病的藥物及其制備方法，屬于藥物技術領域。編碼α2δ-2和α2δ-3的cacna 2 d 2和cacna 2 d 3基因在神經元和一些其它組織[2]中有差異表達。cacna 2 d 4，編碼α2δ-4，表現出主要非神經元[3]的表達

α2δ-1亞基含有一定的結構域，包括Von Willebrand因子a(VWF-a或VWA)領域，已知結合多個細胞粘附和細胞外基質蛋白(SEQ ID NO.1)。VWA域參與蛋白質-蛋白質相互作用，通過它們的金屬離子依賴性粘合位點(MIDAS)motif。在α2δ亞單元中還存在兩個細菌化學感應樣或超高速緩沖結構域，位于VWA域[4]的下游

VWA_N和VWF-A域的近似位置，兩個細菌化學感應域(cachel 1和cacheh 2)和電壓門控鈣通道α2域(VGCC_α2)如圖1所示

α2δ亞基及其結合配體已被認為是神經性疼痛中的治療靶，在癲癇癥[1，5，10]和多種疾病和病癥中包括下泌尿道癥狀，阻塞性肺病

(WO 2004054577 A1)，性功能障礙和kawakai疾病

此外，敲除小鼠中α2δ-1亞基的靶向破壞不是致命的，這些動物缺乏高親和力加巴噴丁結合位點，證明了顯著降低的基礎心肌收縮力和松弛以及減小的L型Ca當前峰值電流幅值[9]

α2δ-1亞基也與癌癥[16，WO 2012/113266]中的治療目標以及突觸生成[17，US2011104181 a 1]的調制有關

建立了α2δ-1在與神經損傷(神經性疼痛)[1，5]相關的慢性疼痛的發展中起到中樞作用。實驗外周神經損傷導致受損的感覺神經元(三叉神經元和DRGs)中的升高的α2δ-1mRNA水平)中α2δ-1蛋白的相應增加以及脊髓[6，7]中的α2δ-1蛋白的相應增加

進一步利用轉基因動物(小鼠)模型研究了α2δ-1亞基在疼痛中的作用。已經表明，在轉基因小鼠中僅在神經元組織中過度表達α2δ-1已經揭示了痛覺過敏和觸覺異常性異常的損傷無關的神經性表型。這清楚地建立了α2δ-1作為參與神經性疼痛表型[8]的開發的亞單位Naiveα2δ-1_/_小鼠表現出了顯著的機械和冷敏感性的行為缺陷，所述方法包括以下步驟：a)將所述a組分與b組分混合；b)將所述第一組分和所述第二組分的至少一種。本發明提供了一種低機械靈敏度，低機械靈敏度，低機械靈敏度，高靈敏度，高靈敏度，高靈敏度，高靈敏度，高靈敏度，高靈敏度，高靈敏度，高靈敏度，