[發明專利]新型肌肉骨骼系統干細胞有效
| 申請號: | 201880033012.0 | 申請日: | 2018-10-24 |
| 公開(公告)號: | CN111225974B | 公開(公告)日: | 2021-09-17 |
| 發明(設計)人: | 韓明觀 | 申請(專利權)人: | 雪拉托茲治療株式會社 |
| 主分類號: | C12N5/0775 | 分類號: | C12N5/0775;C12N5/0735;C12N5/071;A61K35/32;A61K35/34;A61P19/08;A61P19/10;A61P21/00;A61P19/02;A61P29/00 |
| 代理公司: | 北京鍾維聯合知識產權代理有限公司 11579 | 代理人: | 羅銀燕 |
| 地址: | 韓國京畿道城南市盆唐*** | 國省代碼: | 暫無信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 新型 肌肉 骨骼 系統 干細胞 | ||
1.一種用于誘導分化成肌肉骨骼系統干細胞的分化誘導用培養基組合物,其特征在于,
包含頭蛋白、白血病抑制因子、堿性成纖維細胞生長因子、Wnt信號激活劑、細胞外信號調節激酶信號抑制劑以及轉化生長因子-β/激活素/結節信號轉導抑制劑,上述肌肉骨骼系統干細胞能夠分化成骨骼、軟骨、肌腱、韌帶、肌肉及脂肪,
上述Wnt信號激活劑為CHIR99021(9-溴-7,12-二氫-吡啶并[3',2':2,3]疊氮基[4,5-b]吲哚-6(5H)-酮),
上述細胞外信號調節激酶信號抑制劑為PD0325901(N-[(2R)-2,3-二羥基丙氧基]-3,4-二氟-2-[(2-氟-4-碘苯基)氨基]-苯甲酰胺),
上述轉化生長因子-β/激活素/結節信號轉導抑制劑為SB431542(4-[4-(1,3-苯并二惡唑-5-基)-5-(2-吡啶基)-1H-咪唑-2-基]苯甲酰胺)。
2.一種肌肉骨骼系統干細胞的制備方法,其特征在于,包括在權利要求1所述的用于誘導分化成肌肉骨骼系統干細胞的培養基組合物中培養誘導性多能干細胞的步驟。
3.根據權利要求2所述的肌肉骨骼系統干細胞的制備方法,其特征在于,上述培養是在不改變培養基組成的情況下,培養5繼代以上。
4.一種肌肉骨骼系統干細胞,其特征在于,使用權利要求1所述的用于誘導分化成肌肉骨骼系統干細胞的分化誘導用培養基組合物制備而成,上述肌肉骨骼系統干細胞具有如下特征:
a)對于作為外胚層標記的巢蛋白呈陽性;
b)對于作為肌源性衛星標記的Pax7呈陽性;
c)對于作為中胚層標記的α-SMA呈陽性;
d)對于作為多能性標記的LIN28呈陰性;以及
e)對于作為間充質干細胞標記的CD90呈陰性。
5.一種肌肉骨骼系統干細胞的篩選方法,其特征在于,上述肌肉骨骼系統干細胞是使用權利要求1所述的用于誘導分化成肌肉骨骼系統干細胞的分化誘導用培養基組合物制備而成的,
上述肌肉骨骼系統干細胞的篩選方法包括篩選具有如下特征的細胞的步驟:
a)對于作為外胚層標記的巢蛋白呈陽性;
b)對于作為肌源性衛星標記的Pax7呈陽性;
c)對于作為中胚層標記的α-SMA呈陽性;
d)對于作為多能性標記的LIN28呈陰性;以及
e)對于作為間充質干細胞標記的CD90呈陰性。
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