[發(fā)明專利]由具有降低的溶解度的酶制成的生物傳感器及其制造和使用方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201880029593.0 | 申請日： | 2018-05-03 |
| 公開（公告）號： | CN110621999B | 公開（公告）日： | 2021-11-09 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | M.S.威爾遜 | 申請（專利權(quán)）人： | 美國西門子醫(yī)學(xué)診斷股份有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/487 | 分類號： | G01N33/487;G01N27/327;C12Q1/00;G01N27/26 |
| 代理公司： | 中國專利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 章敏;梅黎 |
| 地址： | 美國*** | 國省代碼： | 暫無信息 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 具有 降低 溶解度 制成 生物 傳感器 及其 制造 使用方法 | ||
1.用于檢測流體生物樣品中的至少一種目標(biāo)被分析物的存在和/或濃度的重復(fù)使用型生物傳感器(10)，所述重復(fù)使用型生物傳感器包括：
電極(12)；
分配在平面或圓形形狀的電極(12)的至少一部分上的改性酶(14)，其中所述酶已通過其上的至少一個官能團(tuán)與反應(yīng)物的反應(yīng)而改性以降低其溶解度，以使所述改性酶基本不溶于流體生物樣品和與重復(fù)使用型生物傳感器一起使用的校準(zhǔn)試劑并且基本可溶于具有比所述流體生物樣品和與所述重復(fù)使用型生物傳感器一起使用的校準(zhǔn)試劑低的離子強(qiáng)度的緩沖液，并且其中所述改性酶包含與目標(biāo)被分析物相互作用以檢測目標(biāo)被分析物的活性位點；和
布置在所述改性酶的至少一部分上的膜(16)，其中所述膜將改性酶(14)固定在電極(12)上，并且所述膜可透過待檢測的目標(biāo)被分析物，但基本不可透過改性酶，
其中改性酶(14)上的所述至少一個官能團(tuán)選自醛-、胺-、羰基-、羧基-、羥基-、酮-、馬來酰亞胺-、巰基-和硫醇-反應(yīng)性基團(tuán)，并且其中所述酶選自尿素酶、葡萄糖氧化酶、谷氨酸氧化酶、乳酸氧化酶、丙酮酸氧化酶、肌氨酸氧化酶、肌酸酐酰胺水解酶、肌酸脒基水解酶、抗壞血酸氧化酶、醇氧化酶、膽固醇氧化酶、膽堿氧化酶、膽紅素氧化酶、漆酶、酪氨酸酶、醇脫氫酶、葡萄糖脫氫酶、谷氨酸脫氫酶、乳酸脫氫酶和丙酮酸脫氫酶，
其特征在于，所述電極(12)含有傳感層(18)，所述改性酶(14)分配到傳感層(18)上。
2.權(quán)利要求1的重復(fù)使用型生物傳感器，其中所述反應(yīng)物包含長鏈生物素。
3.權(quán)利要求1的重復(fù)使用型生物傳感器，其中所述膜(16)由選自聚氨酯、硅酮、聚(氯乙烯)及其組合的材料形成。
4.權(quán)利要求1-3任一項的重復(fù)使用型生物傳感器，其中與未改性酶的分子量和/或等電點相比，附著于酶上的反應(yīng)物提高改性酶的分子量和/或改變其等電點。
5.重復(fù)使用型生物傳感器陣列組裝件(50)，其包括：
基底(54)；
多個重復(fù)使用型生物傳感器，其中所述多個重復(fù)使用型生物傳感器的每一個在空間上安置在基底(54)的至少一個表面上，并且其中所述多個重復(fù)使用型生物傳感器的至少一個是權(quán)利要求1-4任一項的重復(fù)使用型生物傳感器(10)。
6.制造權(quán)利要求1的重復(fù)使用型生物傳感器(10)的方法，所述方法包括步驟：
(a) 通過使酶上的至少一個官能團(tuán)與反應(yīng)物反應(yīng)而改性存在于第一緩沖液中的酶，由此產(chǎn)生改性酶(14)，其與未改性酶相比具有降低的溶解度，以使所述改性酶基本不溶于流體生物樣品和與重復(fù)使用型生物傳感器一起使用的校準(zhǔn)試劑，并且其中所述改性酶包含與目標(biāo)被分析物相互作用以檢測目標(biāo)被分析物的活性位點；
(b) 形成改性酶的沉淀物；
(c) 將改性酶的沉淀物再溶解在第二緩沖液中以提供改性酶溶液，其中第二緩沖液具有比第一緩沖液低的離子強(qiáng)度，由此所述改性酶基本可溶于第二緩沖液，但較不可溶于或基本不溶于第一緩沖液；
(d) 將特定量的改性酶溶液分配在電極(12)的至少一部分上；
(e) 在電極上干燥所述改性酶溶液；和
(f) 將膜(16)布置在改性酶和電極的至少一部分上，其中所述膜將改性酶固定在電極上，并且其中所述酶選自尿素酶、葡萄糖氧化酶、谷氨酸氧化酶、乳酸氧化酶、丙酮酸氧化酶、肌氨酸氧化酶、肌酸酐酰胺水解酶、肌酸脒基水解酶、抗壞血酸氧化酶、醇氧化酶、膽固醇氧化酶、膽堿氧化酶、膽紅素氧化酶、漆酶、酪氨酸酶、醇脫氫酶、葡萄糖脫氫酶、谷氨酸脫氫酶、乳酸脫氫酶和丙酮酸脫氫酶，并且所述酶上的所述至少一個官能團(tuán)選自醛-、胺-、羰基-、羧基-、羥基-、酮-、馬來酰亞胺-、巰基-和硫醇-反應(yīng)性基團(tuán)，并且其中所述膜可透過待檢測的目標(biāo)被分析物，但基本不可透過改性酶。
7.權(quán)利要求6的方法，其中下列至少一項適用：
(i) 所述反應(yīng)物包含長鏈生物素；
(ii) 所述膜由選自聚氨酯、硅酮、聚(氯乙烯)及其組合的材料形成；和
(iii) 與未改性酶的分子量和/或等電點相比，附著于酶上的反應(yīng)物提高改性酶的分子量和/或改變其等電點。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于美國西門子醫(yī)學(xué)診斷股份有限公司，未經(jīng)美國西門子醫(yī)學(xué)診斷股份有限公司許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201880029593.0/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
