[發明專利]用于電介質校準的含有C2CL核酸內切酶的組合物以及使用其進行電介質校準的方法

在審

• 申請號: 201880026384.0
• 申請日: 2018-03-06
• 公開（公告）號: CN111051509A
• 公開（公告）日: 2020-04-21
• 發明（設計）人: 金晉秀;金貞垠
• 申請（專利權）人: 基礎科學研究院
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10;C12N15/63;C12N9/16
• 代理公司: 廣州華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 黃愛嬌

1.一種基因組編輯組合物，包括：

C2c1核酸內切酶，編碼所述C2c1核酸內切酶的基因，或者攜帶所述基因的表達載體；和

向導RNA，編碼所述向導RNA的DNA，或者攜帶所述DNA的表達載體。

2.根據權利要求1所述的基因組編輯組合物，其特征在于，所述C2c1核酸內切酶來源于酸土脂環酸芽孢桿菌。

3.根據權利要求2所述的基因組編輯組合物，其特征在于，所述向導RNA由以下序列通式1表示，或者是從序列通式1的序列刪除1-15個核苷酸所得的突變體：

5'-GUCUAGAGGACAGAAUUUUUCAACGGGUGUGCCAAUGGCCACUUUCCAGGUG GCAAAGCCCGUUGAGCUUCUCAAAUCUGAGAAGUGGX₁X₂X₃[(N)n]-3'(序列通式1)

其中，

X₁、X₂和X₃各自為獨立地選自A、U、G和C的核苷酸，以及

(N)n鏈表示n個核苷酸，所述n個核苷酸可以是相同的或者不同的，并且各自獨立地選自A、U、G和C，其中，n是17-23的整數。

4.根據權利要求3所述的基因組編輯組合物，其特征在于，所述刪除是在選自所述序列通式1中的序列AGCUUCUCAAA的1-15個核苷酸進行的。

5.根據權利要求3所述的基因組編輯組合物，其特征在于，所述向導RNA由以下序列通式2表示：

5'-GUCUAGAGGACAGAAUUUUUCAACGGGUGUGCCAAUGGCCACUUUCCAGGUG GCAAAGCCCGUUGAGCUUCUCAAAUCUGAGAAGUGGCAC[(N)n]-3'(序列通式2)

其中，(N)n表示n個核苷酸，所述n個核苷酸可以是相同的或者不同的，并且選自A、U、G和C，其中，n是17-23的整數。

6.根據權利要求5所述的基因組編輯組合物，其特征在于，n是20。

7.根據權利要求1所述的基因組編輯組合物，其特征在于，C2c1核酸內切酶還包括核定位信號。

8.根據權利要求1至7中任一項所述的基因組編輯組合物，其特征在于，所述基因組編輯組合物應用于真核細胞或者真核生物體。

9.一種基因組編輯方法，包括將如權利要求1至7中任一項所述的基因組編輯組合物引入至分離的細胞中或者不包括人的生物體中的步驟。

10.根據權利要求9所述的基因組編輯方法，其特征在于，所述細胞是真核細胞，并且所述生物體是不包括人的真核生物體。

11.一種分離的經基因修飾的細胞，其具有引入至所述細胞中的權利要求1至7中任一項所述的基因組編輯組合物。

12.一種經基因修飾的生物體，所述生物體不包括人，具有引入至所述生物體中的權利要求1至7中任一項所述的基因組編輯組合物。